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- 2017-12-23 发布于河北
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白木香丙二烯氧化物合酶基因的表达分析
白木香丙二烯氧化物合酶基因的表达分析
冯莹莹 张钟秀 董先娟 刘晓 闫雅如 王金铃 王晓晖 史社坡
北京中医药大学中药学院中药现代研究中心 中国中医科学院中药研究所
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摘????要:
茉莉酸 (jasmonic acid, JA) 为植物防御反应的重要信号分子, 其生物合成途径的关键酶是丙二烯氧化物合成酶 (allene oxide synthase, AOS) 。本研究以白木香 (Aquilaria sinensis) 为材料, 设计特异引物, 克隆了白木香As AOS1基因的c DNA序列, 并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、组织特异性分析及非生物胁迫和激素诱导表达分析。白木香As AOS1基因的开放阅读框 (ORF) 长1 575 bp, 编码524个氨基酸, 其蛋白分子质量是58.70 k Da。As AOS1蛋白包含细胞色素P450的保守区域。系统进化树显示As AOS1蛋白与甜橙 (Citrus sinensis) AOS蛋白同源性较高。构建原核表达载体p ET28a-As AOS1并在大肠杆菌BL21 (DE3) 菌株中成功表达As AOS1重组蛋白, 利用Ni2+亲和色谱纯化得到可溶性As AOS1重组蛋白。
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