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水稻抽穗期基因酵母双杂交cdna文库的构建及分析-华中农业大学学报
第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报
31 4 Vol.31 No.4
年 月 ,
2012 8 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Au.2012404~409
g g y g
水稻抽穗期基因酵母双杂交
cDNA 文库的构建及分析
彭 强 吴昌银
,
华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 武汉430070
,
摘要 为研究水稻开花调控的分子网络 构建了水稻品种中花 幼穗分化前倒二叶叶片的酵母双杂交
11 cD-
。 , ( )
文库 制备了高质量的总 用 引物反转录合成 第一链和 合成双
NA RNA OliodT cDNA Lon DistancePCR
g g
,
链 cDNA 通过 SMART同源重组交换技术在酵母菌株 AH109中建立酵母双杂交所需的水稻倒二叶叶片cDNA
。 : 6/ , 8
文库 文库质量检测结果表明 cDNA文库的转化率为 1.178×10 3μgpGADT7-Rec文库滴度为2.65×10
/ , , 。 。
cfumL重组率为 94.7% 插入片段长度为 350~2000bp 该文库可用来筛选水稻抽穗期基因的互作蛋白
; ; ; ;
关键词 水稻抽穗期基因 酵母双杂交 技术 文库 水稻倒二叶
SMART cDNA
中图分类号 ; 文献标识码 文章编号 ( )
S511.503 Q78 A 1000-2421201204-404-06
,
蛋白质作为植物生理调控机制的参与者和执行 文库获得的 Hd3a互作蛋白 它通过与 Hd3a蛋白
[ ]
10
, 、 、 互作 而抑 制 水 稻 开 花 。 和
者 分析和鉴定其与 DNA RNA 蛋白质等生物元
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