SPMEGCMS法快速分析生物体液中氟乙酰胺研究.pdfVIP

SPME—ac／Ms法快速分析生物体液中氟乙酰胺 课题组 (江苏警官学院) 摘要：本文建立了SPME—cc／Ms法同对分析尿液和血液中氟乙酰胺极其衍生物氟乙酸的方 法．取尿样、血液以乙酰胺为内标，加入四乙基澳化胺在溶液中性条件下，采用直接固相微萃取 ／Ms检测选用HP-PLOTQ毛细管柱进行测定．氟乙酰胺及内标完全分离，实验测得氟乙酰胺在5 —90ug／ml浓度范围呈良好的线性关系，检测限为lug／m1．血液中的平均回收率为92．2％．方法简 便、快速、准确，可用于尿液、血液中氟乙酰胺鼠药的检测． cc／Ms， 关键词：SPME(固相徽萃取)， 尿液， 血液， 氟乙酰胺 一、引言 氟乙酰胺是一种高效有机氟农药，它的毒性大，人摄入O．1-0．59会中毒死亡，由于其合成 工艺简单，价格抵、无味、易溶于水对人和牲畜投毒或误杀、自杀死亡的案件屡见不鲜，已成为 刑事中毒案件最常见的毒物之一。但国内外有关氟乙酰胺简单、有效的检测手段的报道很少。澳 大利亚的Allender提出对该药检验报道，用丙酮与水提取，用PFBBr衍生，并用硅镁吸附剂净化 后的酯。再用Gc／ECD分析方法。我国氟乙酰胺检验方法均采用硫靛反应化学法进行分析。该法 干扰物多、不稳定、灵敏度低、费时，只能为辅助方法。其检测限低于lOug，也有报道采用GC／ 性大，中毒死亡后，肝、血组织难以达到lOOug／g(m1)的浓度，除急性中毒致死的胃内容外， 其它中毒脏器难以应用该方法。检材的提取大多经过较为繁琐的样品提取净化过程，费时费力。 提取后有的需生化衍生后进行检测，有的样品检测时干扰严重。易出现定性失误。利用色谱／质 谱法检验氟乙酰胺可使检测的灵敏度和准确性得到提高，本法利用固相微萃取(SPME)具有快速、 简便、干扰少、无溶剂污染等特点。克服了传统样品预处理技术(如吹扫捕集、顶空法、液一液萃 取、超临界萃取等)耗时、效率低、溶剂用量大、操作繁琐等缺点。采用1001tm(PDMS)、微萃取纤 维头同时萃取氟乙酰胺极其内标乙酰胺，经GC／Ms分析，可有效地降基质的干扰，从而确保目标 化合物的分析有足够的检测限，精心筛选的内标乙酰胺与目标化合物完全分离、线性良好，一次 完成了提取、分离、浓缩、进样的全过程，为氟乙酰胺的定量检验提供了有效的方法。 二、实验部分 (一)试剂 氟乙酰胺、乙酰胺纯品由北京市公安局物证鉴定中心提供。 氟乙酰胺及乙酰胺溶液：取此纯品用去离子水均配制为2mg／mL贮备液，4℃下保存备用。 离子对试剂一四乙基溴化胺贮备液：0．1mol／L。 取氟乙酰胺、氟乙酰胺及离子对试剂一四乙基溴化胺贮备液，再用水稀释成氟乙酰胺浓度为5、 的使用工作液。 O．05mol／1。 氢氧化钠，甲醇、食盐、甲醇一乙睛(V／V)、丙酮，试剂均为分析纯。 (二)仪器及分析条件 HP PDMS纤维头(美国SUPELCO公司产 GCD气谱联用仪(美国HP公司)。SPME装置、lOOum 品)。旋涡混合器、水浴箱、pH计和离心机均为国产产品。 mX Initial GC／MS条件：HP—PLOTQ毛细管柱：25．00．32mm柱初温(ColumnTemperature)100 ℃(InitialTime)lmin，升温速率(OvenRamp)lOC／min，终温(Final Time)14．0 10—200。 EoectronIonization(EI)：SolventDelay：5．0min：MassRange：m／z (三)样品的制备 1、取90pL 血液，用氨水调节pH为9，加入10％的硫酸锌使其完全沉淀，分别将上述检材于旋涡混合器2min 混匀，离心机离心，取上清液过水系过滤膜，上清液与0．1mol／L浓度离子对试剂l：l体积混合， 利用硫酸调节pH为7，定容至4mL。固相微萃取后分析。 尿液，将上述检材分别于旋涡混合器2min混匀，过水系过滤膜，上清液与0．1mol／“L浓度离予对 试剂1：l体积混合，定容至4m