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2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议文章集 邀请报告专题
2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议
AgaroseDroplet Microfluidicsfor HighlyParallelandEfficient
EmulsionPCR
Chaoyong Yang, Xuefei Leng, andWenhuaZhang
College of Chemistry andChemical Engineering, Xiamen University, Xiamen, FJ361005,
P.R.China
Emulsion PCR(ePCR)hasprovenapromising techniquefor widerangeofapplications
suchasraremutationdetectionandnextgenerationDNAsequencing because ofits
advantageofmassivelyparallelcolonalamplificationofDNAtemplates. ConventionalePCR
methodssufferseveralproblemsincludingpoor amplificationefficiencyandlimitted
ampliconlength. Toaddressthese challengingproblems, we have developedanagarose
dropletmicrofluidicmethod forhighlyparallelandefficientemulsion PCR.Ourmethod
capitalizesonthecapabilityofa microfabricateddropletgeneratortorapidlygenerate
monodisperse dropletsandtheuniquethermosensitive sol-gelswitchingpropertyofagarose
toavoidtheuse ofmicrobeadsinePCR. Amicrofabricatedagarose dropletgeneratorthat
producesuniform, nanoliter-volume agarose emulsion dropletsforgenomicanalysiswas
developedandevaluated.Uniformagarose dropletsattherange of50to200μmwere easily
obtainedby controllingthemicrofluidic-chipchanneldimension, flowratesofaqueousoroil
phase.PCRwasthenefficientlyperformedinagarose solutiondroplets,whichwas
subsequentlygelatedtomicrobeadsafterPCRtocaptureampliconstomaintainthe
monoclonalityofeachdroplet.Ourresultsindicatedsingle copyDNAcanbeefficiently
amplified(90%amplificationefficiency)inagarose droplets.The agarose dropletmethod
reportedhereallows uniform, massivelyparallel,highlyefficientmonoclonalamplification
andholdsgreatpotentialfor avarietyofapplicationssuchassingle cellexpressionstudy, rare
mutantdetection,aswellasnextgenerationhighthroughput sequencing.
2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议
基于量子点探针的微纳集成蛋白质芯片技术
樊春海
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