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植物组织培养 第二章 植物组织培养的基本原理
第二章 植物组织培养的基本原理 本章内容提要: 一、植物细胞的全能性 二、植物细胞的分化 三、离体培养植物细胞脱分化和再分化 四、植物离体分化过程的类型 五、愈伤组织 六、植物胚状体 一、植物细胞的全能性 1、植物的再生 繁殖方式:有性繁殖、无性繁殖 2、植物细胞全能性概念 每一个细胞都带有该种植物完成生命周期的全部遗传信息,即基因组完整;都能在一定的条件下发育成完整的植株,即功能完整性。 细胞全能性 植物组织培养的核心理论 细胞全能性实现途径: 1)以植物的体细胞为材料 2)以植物性细胞为材料 3)原生质体 4)体细胞杂交 5)转基因细胞 植物细胞全能性的内因: 动、植的区别:(1)营养方式 (2)代谢类型 (3)发育方式 二、 植物细胞的分化 细胞分化概念 细胞基因的程序性表达而导致细胞结构和功能的特化。如植物各个器官的分化。是器官分化、组织分化的基础,是发育生物学的一个核心问题。 各种生物细胞的分化 细菌、粘菌、真菌、藻类、地衣的分化 种子植物细胞的分化 细胞分化的本质:基因的差次表达 三、离体培养植物细胞脱分化和再分化 1、细胞脱分化和再分化的概念 细胞脱分化: 细胞再分化: 2、离体培养条件下脱分化和再分化的时期 1)诱导期 2)分裂期 3)分化期 3、植物细胞的脱分化和再分化的条件 1)机械隔离和生理隔离 2)植物激素的作用 4、再分化的类型 1)细胞水平的再分化 ——形成各类细胞 2)组织水平的再分化 ——形成各类组织 3)器官水平的再分化 ——形成各种器官 四、植物离体分化过程类型 1、无菌短枝型(器官型之一:腋芽萌发) 外植体为单芽茎段,转入成苗培养基,成苗后,再剪成带一叶的单芽茎段继代,又可成苗。 特点:不经过发生愈伤组织,是最能使无性系后代保持原品性的一种繁殖方式。 缺点:繁殖系数不高。 外植体还可以是叶、花器和鳞片等。 2.?丛生芽增殖型(不定芽型) 茎尖或初代培养的芽,在适宜的培养基上诱导,不断发生腋芽而成丛生芽,然后再转入生根培养基,诱导生根成苗,扩大繁殖。 优点:从芽到芽,遗传性状稳定,繁殖速度快。 3、 器官发生型 从植物叶片、子房、花药、叶柄、胚轴等诱导出愈伤组织,从愈伤组织上诱导不定芽或根来,最后形成再生植株的过程。 优点:繁殖速度快; 缺点:但可能会发生变异,用于良种繁殖时要注意。 4、胚状体发生型(器官型之二) 从植物叶子、子房、花药、胚珠、叶柄等诱导体细胞胚胎发生。其发生及成苗过程类似合子胚或种子。 优点:胚状体具有数量多、结构完整、易成苗和繁殖速度快的特点,是植物离体无性繁殖最快的方法,也是人工种子和细胞前提,受到国内外的普遍重视。 缺点:机理尚不清楚,有的还存在一定变异;良繁时要先经过试验后才能在生产上大量应用。 植物胚状体发生过程 5、原球茎型 兰科等植物的培养属于这一类型,原球茎(protocorm)是缩短了的、呈珠粒状的、由胚性细胞组成的、类似嫩茎的器官。 培养兰花的茎尖或液芽可直接产生原球茎,可以分化成植株,也可以继代增殖产生新的原球茎,这取决于条件和培养基。 五、愈伤组织 概念:细胞经脱分化过程中形成的疏松(致密)、无特定结构和极性的一团组织。 形成过程: 1)诱导期 2)分裂期 3)分化期 六、 植物胚状体 植物胚状体(体细胞胚)发生的普遍性 可从植物体的任何一个部分发生。 1、花药和花粉培养 2、愈伤组织培养 3、离体器官培养 4、单细胞悬浮培养 植物胚状体的概念 胚状体起源:非合子细胞(体细胞) 途径:离体培养 形成与发育过程类似与种子胚(球形胚、心形胚、鱼雷胚、成熟胚) 植物离体培养中器官发生的四种基本形式 1、先根 后芽 2、先芽 后根 3、先愈伤组织 后芽和根 4、细胞脱分化后形成类胚结构 胚状体的类别和特点 1、类别(按来源分) 1)体细胞胚 离体培养条件下,来源与各个器官及他们的组织和细胞,染色体组二套,可发育为正常可育植物体; 2)生殖细胞胚 离体培养条件下,来源与大孢子细胞和小孢子细胞,染色体组一套可发育成单倍体植物,加倍后可育; 3)三倍体胚 源于胚乳细胞,染色体组三套,不育。 胚状体的特点: 1、两极性; 2、胚状体与培养的供体外植体的维管组织 无直接联系。 作业与 探究 1、试简述植物分化和在分化过程。 2、试简述植物发生的几种方式,并比较他 们的优缺点
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