蛋白质的分离纯化之不同材料的预处理方法.pdfVIP

活性蛋白整体方案 Active Protein Solutions 蛋白质的分离纯化之不同材料的预处理方法 摘要 ：本文介绍了在蛋白表达纯化试验中 ，对不同来源的材料的预处理。主要从植物 ，动物和微生物三种源材料的 特点和注意事项进行描述 ，并附有原核蛋白表达的案例。 蛋白质在分子生物学中的分类 ，大体上可分为天然蛋白和重组蛋白。提取天然蛋白和构建重组蛋白都需要先确定生 物原材料 ，如植物材料主要以植物的叶 ，胚 ，果实和根茎等为主 ；动物通常是选用实验动物的器官和组织 ；而微生 物则是微生物菌体本身或发酵液。从原则上讲 ，任何一种自然界中存在或不存在的蛋白质都可以被外源表达出来 ， 像原核蛋白表达就是以大肠杆菌 （E.coli ）为宿主菌表达克隆基因 ，在原核表达体系中 ，重组蛋白的含量比杂蛋白 的含量高的多 ，所以选择和设计合适的分离纯化方案对于重组蛋白表达纯化的下游实验就显得尤为重要。 在提取和分离蛋白时有以下几点需要注意 ： 1. 蛋白质提取应尽量多的提取出活性蛋白 ，避免各因