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由嗜水气单胞菌引起的镜鲤溃疡病 卢形岩 杨雨辉 刘红柏 中〔国水产科学研究院黑龙江水产研究所，150070) 德国镜鲤是从原西德引进的品种，经过黑龙江水产研究所20多年的系统选育，已选育 出适于我国大部分地区养殖的德国镜鲤选育系，德国镜鲤生长速度快、含肉率高、肉质好， 已推广到十几个省市。该品系的抗病力较强，但1999年春天在哈尔滨地区有一种由嗜水气 单胞菌引起的溃疡病，在发病初期，病鱼体表出现局部发炎、红肿，随着病情发展，发炎的 地方出现胞贬，形成脓疙，脓疤内充满脓汁，接着皮肤腐蚀脱落，甚至肌肉被腐蚀成一个 洞，严重时可看见内脏和骨骼，本文对此病的病原进行了分离，进行了形态、培养特性、致 病性以及药物敏感性实验，并在此基础上做了生产性治疗实验。 1材料和方法 1.1病原菌的分离 取典型症状濒死病鱼，先用70%已醇消毒体表，然后再用无菌生理盐 水冲洗体表一遍，无菌操作，自肝脏、肾脏和脓液处在普通营养琼脂培养基划线涂布，28rl 培养24h后，挑取形态比较一致的优势菌落进一步划线纯化，直至获得纯培养后移人斜面， 甘油保存备用。 1.2 人工感染实验 挑选体重50g左右的健康镜鲤，在水族箱内暂养一周，实验期间水温 控制在28fi，每个水族箱内放水60L，每组放鱼20尾，每实验组设一个重复，实验期间连 续观察10天，实验期间不换水，连续充气。 1.2.1注射感染 将于斜面培养24h的细菌用无菌生理盐水洗下并稀释成不同浓度的菌悬 液，背鳍注射每尾0.2mL，对照组注射等量的无菌生理盐水。 1.2.2 浸浴感染 将培养的细菌用普通肉汤培养基稀释加人水族箱中制成不同浓度的菌悬 液，试验鱼用无菌手术刀片轻微划伤表皮，对照组不加菌液;另一组用同样处理的实验鱼浸 泡15min后再放人不加菌液的水族箱内培养，对照组鱼不经划伤处理。 1.2.3 涂抹实验 用灭菌棉棒直接沾取经24h培养的菌苔涂抹到划伤的鱼体上，然后放人 不加菌液的水族箱内暂养，对照组鱼涂抹前不经划伤处理。 1.3病原菌的分类 从自然发病的鱼体分离三株菌，人工感染分离3株，共计6株，参照 Popoff(1984)介绍的方法，从细菌形态和生理生化特征方面对致病菌进行鉴定，将培养 24h的细菌用296磷酸钨磷酸缓冲液负染，透射电子显微镜观察菌体形态，应用浙江省军区 后勤部卫生防疫检验所出品的GYZ-9V细菌生化鉴定系统及南京农业大学畜禽疫病重点实 验室馈赠的致病性气单胞菌诊断试剂盒，标准嗜水气单胞菌株由中国水产科学院珠江水产研 究所鱼病室馈赠。 1.4 药敏实验 试验共用18种药敏纸片，由黑龙江省临床检验中心提供，采用涂布法接 种，每个平皿贴纸片5个，每种药品均设2个重复，28℃培养24h后测定抑菌圈直径大小， 按Nccls推荐标准评价。 1.5 治疗实验 于哈尔滨市万宝镇及长岑湖养殖场，采用全池遍洒抗生素1次后，遍洒2 ·685 ， 次体外消毒剂，每天1次，同时辅以环丙杀星、VC内服，每日投饵两次，连用3天。 2 结果与讨论 2，1人工感染实骏 肌肉注射结果表明:分离到的3株菌在一定浓度下导致实验鱼迅速死 亡，但并不表现自然发病的症状，低浓度注射组未死亡的实验鱼在实验5天后表现为肌肉、 鳃及内脏出血症状，但亦不表现出自然发病症状。创伤感染实验鱼表现出症状与病鱼极为相 似。 表13株菌肌肉注射撼染结果 菌 株 1 } ，株n 菌 吃朱 田 浓度个，今正 死亡率 1浓度个乃们L 死亡率 {”度个、-死亡率 2，又106 6八。 } } 4朋 }一} 24、1护 5八。 {37·、1护 } 1。月。 2.4xl07 8八C 2一9xl07 名八。 { 3.7xlo， 2月Kl护 10八0 3刀xl沪 10八。 」{ :一4从1护 10月0 29x10，