丙肝核心抗原-CD40L胞外段真核表达载体的构建及其免疫原性分析.pdfVIP

， ， ， ， — — ｈｉｎＪＬａｂＤｉａｎＪｕｎｅ２０１３ Ｖｏｌ１７ ｏ．６ ９９２ Ｃ ｇ Ｎ 文章编号： （ ） １ ００７－４２８７ ２０１３０６－０９９２－０３ 丙肝核心抗原－ＣＤ４０Ｌ胞外段真核表达载体的 构建及其免疫原性分析 １ １ １ ２ ３ 陈佳玉 ，戚永孝 ，陈 洁 ，金晓燕 ，张丽荣  　 （ 台州学院医学院，浙江台州 ； 台州市立医院，浙江台州 ； 长春市中日联谊医院，长春 ） １ ３ ３ １ ． １８０００２． １８０００３． ３００３３ 摘要：目的 构建丙肝核心抗原－ＣＤ４０Ｌ胞外段融合蛋白真核表达载体，并探讨其免疫原性。方法 应用基因 　 　 重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体 ｃ 并加以鉴定。该表达质粒肌肉内注射免疫 ｐＤＮＡ３．１ｃｏｒｅＣＤ４０Ｌ 小鼠， 法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体，流式细胞仪检测小鼠外周血 淋巴细胞亚型， 法检 Ｅ ｒ ＬＩＳＡ Ｔ ｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ 测外周血单个核细胞内细胞因子， 杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果 构建了真核表达载体 Ｃ ｃ ＴＬ Ｄ 　 ｐ ＮＡ３．１ｃｏｒｅＣＤ４０Ｌ，该载体能诱发小鼠产生高滴度的抗丙肝核心抗原的抗体，流式和 ｒ 结果证实该质粒能诱 ｅａｌｔｉｍｅ 使小鼠 淋巴细胞由 期向 和 转换，并以 为主， 杀伤结果显示该表达质粒能诱使小鼠产生高水 Ｔ Ｔ Ｔ Ｔ Ｃ ０ ｈ１ Ｔｈ２ ｈ１ ＴＬ 平的细胞杀伤能力。结论 成功构建了真核表达质粒 ｃ ，该质粒能够在小鼠体内正确表达，并 ＤＮＡ３．１ｃｏｒｅＣＤ４０Ｌ