油菜几丁质酶的纯化及其在抗菌核病中的作用.PDFVIP

南京农业大学学报　1999, 22 (3) : 4 1～ 44 　 J ou rna l of N anj ing A g r icu ltu ra l U n iv ers ity 油菜几丁质酶的纯化及其在抗菌核病中的作用 1 2 1 3 于汉寿 　张益民 　陈永萱 　吴汉章 (1 南京农业大学资源与环境科学学院, 2 南京农业大学理学院, 南京 2 10095; 3 ) 　 江苏省镇江农业科学研究所, 江苏句容 2 12400 摘要　油菜叶片经油菜菌核病菌 (S c lerotin ia sc lerotiorum ) 或水溶性壳聚糖处理后, 几丁质酶活性明显提高, 分别在处理 后 1 d 和 2 d 达活性高峰, 比对照分别高 5 倍和 2 倍左右。被激发提高的几丁质酶表现为内切酶活性, 细胞间的几丁质酶 比活力显著高于细胞内的酶比活力。菌核病菌侵染后的油菜叶片提取液经 60% 饱和度的硫酸铵沉淀, 再通过再生几丁质柱 亲和层析得到了纯化的几丁质酶, 经 显示单一的谱带, 其相对分子质量为 32 000。纯化的油菜叶片几丁质酶 SD S PA GE 能降解油菜菌核病菌菌丝细胞壁, 在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上可抑制菌丝生长。 关键词　油菜; 几丁质酶; 壳聚糖; 菌核病菌; 纯化 分类号　 432 23 S Rape ch it ina se pur if ica t ion an d po ss ible f un ct ion in re s istan ce to rape root rot (S cler ot in ia scler ot iorum ) 1 2 1 3 Yu H an shou , Zh an g Y im in , Ch en Yon gxu an an d W u H anzh an g (1 Co llege o f R e sou rce s an d Env ironm en ta l Scien ce s, 2 Co llege o f Scien ce s, 3 N anj in g A g r ic U n iv , N anj in g 2 10095; Zh enj ian g In st itu te o f A g r icu ltu ra l Scien ce s, J u ron g C ity ,