石竹耐热变异体的离体诱导、筛选及鉴定研究.pdfVIP

摘 要 本实验以石竹 (Dianthuschinensis L.)栽培品种 天‘王 星’为供试材料，通过直接诱导不定芽和诱导愈伤组织再分化这 两种途径建立了再生体系。以播种无菌苗的叶片和子叶为外植体， 利用离体培养结合辐射诱变的方法，在热胁迫条件下进行定向筛 选，经过三轮筛选后，获得了比原始材料更耐热的石竹耐热变异 体。耐热性鉴定表明，这种耐热性能够通过无性繁殖的方式传递 给后代。实验结果如下: 1.6-BA是直接诱导不定芽和诱导长期培养的愈伤组织再分 化最有效的外源激素，适宜的质量浓度范围在0.5-2.Omg/L之间， 当6-BA为l.Omg/L,NAA为0.3mg/L时，不定芽分化频率最高， 小苗生长状况也最好。将6-BA与NAA,Ad等生长调节剂混合使用 可提高愈伤组织再分化诱导效果。增殖继代培养基中6-BA的质量 浓度在0.1-0.3mg/L之间为宜，浓度过大，虽然芽增殖数量增多， 但苗的畸形化和玻璃化现象严重。 2.将正处于分化阶段的石竹离体叶片置于35C恒温热胁迫条 件下或45℃间歇 3-5h/d热胁迫条件下培养 12d，能获得一定数 量的有效耐热苗，可作为石竹耐热性筛选的适宜选择压力。 3.使用lco源Y射线作为诱变