铁蛋白在单壁碳纳米管修饰电极上的直接电化学过程研究.pdfVIP

第 41卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 特约来稿 第 2期 2013年 2月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 167～173 DOI：l0．3724／SP．J．1096．2013．20182 铁蛋 白在单壁碳纳米管修饰电极上的直接 电化学过程研究 谢 芬 杨丽君 刘诺亚 熊华玉 文 为 张修华 王升富 (湖北大学化学化工学院，武汉 430062) 摘 要 采用溴化十六烷基三甲基铵 (CTAB)分散的单壁碳纳米管 (SWNTs)将铁蛋白(Ft)固定在玻碳电极 (GCE)表面，制备 了铁蛋白一单壁碳纳米管一溴化十六烷基三甲基铵膜修饰玻碳 电极 (Ft—SWNTs—CTAB／GCE)。 透射电子显微镜和原子力显微镜用于该膜的形貌表征，红外反射吸收光谱表明复合膜中的Ft保持原有的天 然结构。采用循环伏安 (CV)法研究了Ft在此修饰电极上的直接电化学和Ft中铁储存和铁释放的机理：在 电化学还原过程中，Fe从蛋 白质中还原出来，并在电化学氧化过程中重新进入到蛋 白质内，CV曲线上有较 好的氧化还原峰，峰电流较大，响应信号较好。利用去铁铁蛋白进行对比实验 ，进一步证实了Ft在 SWNTs． CTAB修饰电极上的铁储存和铁释放过程。 关键词 铁蛋白；单壁碳纳米管；铁储存；铁释放 ；直接电化学 1 引 言 铁蛋白(Ft)是一种水溶性的含铁球蛋 白，它在细胞中能储存多余的铁，且在细胞需要时又释放出 铁。微团外的壳层蛋白质有两种不同结构的亚单位，并按4：3：2对称分布，这些亚基的分布排列形成了 8个亲水和 6个疏水的通道 ，使外部与蛋 白质 内部连通[1]。天然 Ft性质十分稳定，利用铁螯合剂可 以 使 Ft极慢地释放出其蛋白质内部的Fe¨。还原剂的加入 ，会使 Ft释放铁 的速率加快约 1×10。倍 。然 而Ft释放铁的机理尚不清楚，近年来，Fe被氧化进入到Ft球壳内部的机理研究引起了人们的广泛关 注，铁进入球壳是通过亲水性的3一折叠通道 ，并且在羧酸盐残基浓度较大的区域进行螯合 。文献 [5] 对 H．链和 L．链 Ft分别重组后研究发现，只有H一链 的Ft能催化铁 的氧化，是铁发生氧化的活性中心。 研究表明，在 Ft储存和释放铁的过程 中都伴随有电子的转移。 目前，采用 电化学方法对Ft的研究主要是针对其机理方面的探索。文献[6]指出，马脾 Ft在电极上 因无法得到电子而不能发生还原 ，认为它是一种惰性的蛋 白质[6]。但不久这个结论就被推翻了。Zapien 等分别用氧化铟掺杂锡 电极 、裸金电极 和3．巯基丙酸 自组装膜修饰Au电极 研究了马脾Ft的电子 传递过程。研究结果表明，马脾Ft能够在电极上发生氧化还原反应，既能释放又能储存Fe 。Wu 研究了Ft在纳米金胶 电极上的直接电化学及催化氧化抗坏血酸，但对 电化学条件下Ft中铁的释放和 储存过程的研究不够深入；而Zapien等 制备的电极耗时较长(约60h)。因此建立一种简单、快速的 Ft电化学研究方法十分必要。 碳纳米管(CNTs)具备优 良的物化性能，用它制成的电极能促进电子传递，在 电分析领域 已被广泛 关注。本研究采用单壁碳纳米管 (SWNTs)一溴化十六烷基三 甲基铵 (CTAB)将马脾 Ft固定在玻碳 电极 (GCE)表面，制备了铁蛋 白．单壁碳纳米管．溴化十六烷基三 甲基铵膜修饰玻碳 电极 (Ft—SWNTs— CTAB)。研究了Ft在SWNTs—CTAB修饰电极上的直接电化学，初步探讨了Ft中铁储存和释放的机理。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 CHI660A 电化学系统(上海 CHI公司)；三电极 电解池 ：GCE或Ft—SWNTs—CTAB／GCE为工作 电 极，饱和甘汞电极 (SCE)为参比电极，铂丝为对 电极；Spectrum OneFTIR红外光谱仪 (PerkinElmer公 2O12_o5-26收稿2O12一l0_o9接受 本文系国家 自然科学基金 (Nos20875023)资助 E-mail：wangsf@hubu．edu．cn 168