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8 生物反应动力学及过程分析 生物反应动力学 对生物反应的动力学特性的研究和分析，有助于制订合理的工艺控制策略，提高反应的效率，是生物过程研究的重要内容 生物反应动力学研究生物反应过程中细胞生长、底物(营养物)消耗和产物生产速率之间的关系和特点，是以过程的物料平衡为基础。 两种情况 以酶、固定化酶、细胞、固定化细胞为催化的反应比较简单； 以增殖细胞为催化剂，通过一系列复杂的代谢反应，将成分转变为新的细胞及其代谢产物。 8.1 酶反应 8.1.1 单底物酶触反应 在单底物酶触反应中，底物首先与酶结合，生成底物和酶的复合物，然后复合物分解形成产物并释放出酶，产物的生成速率用米氏方程表示： V= Vmax [S]/(Km +[S]) 在推导米氏方程式时．假定底物浓度比酶浓度高得多。如果底物浓度与酶浓度相近，米氏方程会有很大误差， 参数求取 单底物酶反应的反应速度与底物浓度呈双曲线关系(图8-1)，不易直接从v-s曲线求出常数Vm和Km。 通常利用双倒数法估计这两个参数。对式(8-5)取倒数，有 8.1.2 底物抑制 底物浓度增加到一定程度，继续增加底物浓度反而会引起反应速度的下降(图8-4)，这种现象称为底物抑制。 按式(8-1)进行反应的同时，酶与底物的复合物和底物生成不能分解的复合物ES2。浓度d 反应的离解常数为Ks(=k-3/k+3)。设K为复合物ES的离解常数(即是 k2/k1)，通过物料平衡求出ES的浓度，进而得到反应速度方程 Ks较大时，复合物ES2不太稳定，因而底物抑制作用较弱，Ks较小时，则底物的抑制较强。 若将1/v对s作图，在高底物浓度范围可得到直线，它与1/v轴交于1/Vm，与s轴交于-Ks。如果反应速度达到最大时底物浓度为smax，由于dv/ds = 0,因此 8.1.3 抑制剂的影响 在一些酶反应中。由于某些物质的存在，会使反应速度下降，按照抑制剂作用方式的不同，酶反应可分成几种类型。 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 可逆反应 （1）竞争性抑制（Competitive inhibition） 抑制剂具有与底物类似的结构，竞争酶的活性中心，并与酶形成可逆的EI复合物，阻止底物与酶结合。 可以通过增加底物浓度而解除此种抑制。 eg:丙二酸、戊二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制 非竞争性抑制小结： （1） Km不变，Vmax降至Vmax/（1+[I]/Ki） （2）抑制程度决定于[I]和Ki ，与底物的Km和[S]无关： 抑制程度与[I]成正比 在一定[I] 下， Ki越大，抑制作用越小 （3）反竞争性抑制 在反竞争性抑制的反应中，抑制剂仅与复合物ES作用，生成底物—酶抑制剂复合物； E+S→ES+I →ESI≠ P 因此产物的生成速度 与非竞争性抑制相似，即使底物浓度很高，反应速度也达不到最大反应速度。 常见于多底物的酶促反应中 8.2 培养过程的物料平衡 8.2.1 得率系数和比速率 8.2.1.1 得率系数 消耗的碳源量之比称为细胞关于碳源的得率系数 式中 △X为菌体浓度的增加； △ S为碳源浓度的减少。Y X/S倒数反映了生成单位质量细胞所需的碳源量。 类似地还有关于氧的细胞得率系数 产物关于碳源的得率系数 产物关于细胞的得率系数 二氧化碳关于碳源的得率系数 8.2.1.2 比速率 细胞的生长速率和细胞所处的培养环境(如温度、pH、培养基、溶解氧浓度、离有关，也与细胞本身的浓度有关。细胞的生长速率可以看做是关于细胞浓度的一级反应 式中 X为细胞浓度；t为时间；反应的速度常数μ为比生长速率。 分批培养的情况下，比生长速率可以由下式定义 比生长速率是反映细胞生长特性的重要参数。 其中S，O2，CO2和P分别为基质浓度，溶解氧浓度，二氧化碳浓度和产物浓度。 基质的比消耗速率 氧的比消耗速率(或呼吸强度) 氧化碳比生成速率 产物的比生产速率 二氧化碳比生成速率和呼吸强度之比称为呼吸商， 8.2.2 培养过程的化学计量关系 在培养过程中物质的相互转化可用下式表示 碳源 + 氮源 + 氧 →细胞 + 产物 + 水 + 二氧化碳 α1——碳源的含碳量 α2——细胞的含碳量 α3——产物的含碳量 α4——二氧化碳的含碳量 在基本培养基中，细胞所消耗的碳源，用于产生能量、合成细胞成分及产物 式中 △ SM是用于产生能量供维持代谢(包括细胞的运动、胞外物质向胞内输、胞内高分子物质形成一定空间结构等所需能量等)所消耗的碳源部分； △ SG、是用于产生能量供细胞生长所需的部分； △SA是用于同化作用构成细胞成分的部分； △Sp是用于形成产物的