第五讲 蛋白质遗传.docVIP

第五讲 蛋白质遗传 第五讲 蛋白质遗传 一、朊病毒－－感染性蛋白质 二、朊病毒的繁殖 三、朊病毒是细胞中的非孟德尔遗传因子 四、朊病毒的遗传标准 五、朊病毒蛋白质（PrPSc）－－蛋白质基因 六、朊病毒中有一个独立的prion决定域 七、消耗性蛋白与遗传性蛋白 八、作为细胞结构的“蛋白质复合体”的遗传 一、朊病毒－－感染性蛋白质 二、朊病毒的繁殖 三、朊病毒是细胞中的非孟德尔遗传因子 四、朊病毒的遗传标准 五、朊病毒蛋白质（PrPSc）－－蛋白质基因 六、朊病毒中有一个独立的prion决定域 七、消耗性蛋白与遗传性蛋白 八、作为细胞结构的“蛋白质复合体”的遗传 羊瘙痒症：早在18世纪，这种疾病就在欧洲的一些国家流行。患病的羊由于奇痒无比，在树上或其他物体上用力摩擦，致使毛皮脱落，故称为瘙痒症。以羊瘙痒症的发病机制的研究为契机，人们开始注意到蛋白质遗传。 真正对阮病毒一词的提出是在1982年。意指可转移性海绵样脑软化病的蛋白质病原体，它能引起羊瘙痒病、疯牛病、鹿、猫、水貂等的海绵样脑软化病，更严重的是能引起人的震颤病、克雅氏病和吉斯综合症等 症状：脑组织的海绵样化、空泡化，星形胶质细胞和微小胶质细胞的形成以及阮病毒蛋白的积累，致使个体无免疫反应，产生认知和运动功能的严重衰退直至死亡。 已经证实人的震颤病、克雅氏病和吉斯综合症和羊瘙痒症是同一类蛋白质病原体感染的疾病，这些疾病通称为传染性海绵样脑软化病。患者脑子病区因神经组织的大量丢失及囊泡化而呈海绵样，并存在大量的淀粉样蛋白沉积。这种沉淀是一种片层的蛋白质纤维结构，其基本的分子结构就是后来发现的阮病毒分子。 阮病毒是一种非DNA/RNA的传染病原，其分子结构完全不像已知的细菌、真菌、寄生物、类病毒和病毒等那样以所含的核酸为遗传物质，它是一种蛋白质病原体，称为阮病毒蛋白 1、朊病毒的分子结构与特性 2、朊病毒基因及其表达 3、朊病毒的感染途径 一、朊病毒－－感染性蛋白质 被阮病毒感染的病体中发现有一种特殊的蛋白质，是一种传染性的抗蛋白酶的、分子质量为27-30kDa的蛋白质，称为PrP27-30。 PrP27-30是一种侵染性且不含核酸的蛋白质，是构成阮病毒的基本单位。但是， PrP27-30本身不具有侵染性，而由3个PrP27-30分子构成的“阮病毒颗粒”具有高度侵染性。 PrP27-30还能聚集成杆状颗粒，约由1000个PrP27-30构成的这种杆状体总是排列成丛，杆和丛都有传染性。 阮病毒有17种，246个氨基酸组成。 它包括两种形式：正常的细胞型（PrPc）和异常的病原型（PrPsc）。 1、朊病毒的分子结构与特性 PrPc的分子质量为33-35kDa, 对蛋白酶敏感；完整的PrPsc的分子质量也为33-35kDa,但具有抗蛋白酶的活性。 PrPSc和PrPc在一级结构上完全相同，但在蛋白质构象上不同。 PrPSc比PrPc具有更多的β折叠结构，它经过有限的水解，移去N-末端的67个氨基酸而成为一个141个氨基酸的抗蛋白酶的核心，即PrP27-30。 PrPsc不是传染性阮病毒颗粒的组分，它形成后经过水解，主要以PrP27-30的形式存在，这是才成为阮病毒颗粒的成分。 PrPSc和PrPc都含有一对二硫键和两个N型复合寡糖链，二硫键和糖基化残基都在PrP的C端。N端含有22个氨基酸残基组成的信号肽序列，C端含有23个氨基酸组成的糖基磷酸肌醇锚受体结合位点。 金仓鼠的阮病毒蛋白示意图 N端含(SP)信号肽和及C端SS疏水信号序列的蛋白全长 生物合成时删去SP序列和在锚定GPI后删去SS序列所剩余的蛋白 PrP 27 – 30分子，它是PrPsc经有限的水解，移去N-末端的67个氨基酸而成为一个141个氨基酸的抗蛋白酶的核心 PrPc是一种膜蛋白，它定位于细胞膜的穴样内陷类结构域（CLDS）。 PrPSc和PrPc在生化特性上有如下不同： 在非变性的去污剂中，PrPsc不溶解 PrPsc具有抗蛋白酶的特性 PrPSc和PrPc都借助于磷脂（GPI）在细胞膜表面附着附着，经磷酸肌醇脂酶C酶解后，PrPc从膜上释放出来，而PrPsc则不释放 用Triton-X100进行相分配后，PrPc在水相内，而PrPsc则在Triton-X100相内 特异的抗体只与PrPsc有血清反应，而与PrPc无反应。说明两者具有不同的构象 PrPSc和PrPc糖基化的比例和部位不同，PrPsc的糖基化比例要低于PrPc。 2、朊病毒基因及其表达 阮病毒蛋白本身并不含核酸，但它是由宿主染色体基因编码的。 迄今已克隆了包括人在内的30多种动物的阮病毒基因，并推导和测定了它们的序列：人的阮病毒蛋白基因定位于20号染色体短臂上，小鼠的阮病毒蛋白基