牛精原干细胞体外长时间存活增殖及鉴定.pdfVIP

武汉华中农业大学 2006．10 牛精原干细胞体外长时间存活增殖及鉴定 毕聪明k2，张仕强tt彭树英1，吕宁。，张涌1 (1西北农林科技大学生物工程研究所，杨凌712100；2锦州医学院畜牧兽医学院，锦州121000) 摘要：探索了血清浓度以及SCF、LIF，GDNF对牛精原干细胞体外存活和增殖的影响，并对其进行了鉴 bovine 定．试验l：以高糖OMEM为基础培养液，添加浓度为O％、2．5％、5％乖10％的胎牛血清(Fetal 合适．试验2：培养液中加入不同浓度的SCP、LIF及GDNF，可增加精原干细胞的数量，其中加入20pg／L GDNF、10 SCF、80“g／L pg／LLIF后，与对照组比较能显著提高精原干细胞数(P0．05)．采用碱，l生磷酸 酶染色、细胞免疫组织化学染色和RT-PCR对牛精原干细胞进行鉴定，结果碱性磷酸酶染色呈弱阳性；细 胞免疫组织化学染色IntegrinDl阳性、c-kit阳性：经RT-PCR扩增，获得了120bp的Gfrc【1序列