猪肌生成抑制素基因敲除载体的构建.pdfVIP

902 振兴吉林老工业基地——科技工作者的历史责任 猪肌生成抑制素基因敲除载体的构建 欧阳松应‘ 周传香2 吕文发1 逄大欣- 欧阳红生 (I解放军军需大学军事兽医系长春 130062；2吉林大学121腔医学学院长春130041) 摘要：根据本研究组已完成的测定猪肌生成抑制素基因组序列和GenBank上提供的牛肌生成抑制 3kb 6．0软件设计两对引物，以猪基因组DNA为模板，分别扩增长为4 素基因序列(6691bp)，采用Oligo 和l4kb片段作为同源长短臂。在长臂扩增引物5’-端加上酶切位点及保护碱基，PCR产物纯化后进行核 切得到含相应粘性末端的短臂片段。再以先短臂后长臂的顺序插入到通用型基因敲除载体pSSC．9的正 PCR鉴定均表明成功构建了猪肌生成抑制素基因敲除载体。为下一步构建肌生成抑制素基因缺失成纤维 细胞并以此细胞进行肌生成抑制素基因敲除猪的研究奠定7基础。 关键词：猪肌生成抑制素基因敲除置换型载体 肌生成抑制素myostatin又称GDF一8(growt