猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建(1).pdfVIP

猪的传染宿 猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长 感染性克隆的构建 吕健袁世山 (中固农业科学院上海善匡研究所，中圈动物卫生与泷行鹉学中心上海分中心动物传染病防治研究室农 业部动斩寄生虫病重点实齄室上海200232：) 擅要近年采。在垒国范围广泛流行井且引起巨走烃济损失妁“籍无名高热”的主要癌嚣之一为猪警殖与 呼吸综合征病毒(PRRsⅥ．为了便于时PRRSv进行反向连传操作，拳研究根据PRRsv基因组序列设计特异 性引物，分五段扩增，将得到的片段克隆到pBhJcsc—ptIISK(+)截体中，并且利用相关的重叠区酶切位点特 其构建成为全长克隆．在扩增5’瑞时．运用5’乩惦E获得了基因蛆5’t末端序列。在亚克隆八pBIucS州ptII sK(+)并且在5’端上游引入17启动子序列．选取一十克隆在3’端0RF6下游引入MIuI位点．以期作为感染性 分子克隆的筛选标志．最终获得了舍有PRRSvJ)【0612株基因妞全长cDlqA的重组质枉口J)(0612和舍有分子 标志Mlu l的基固组奎长cDNA克隆啦0612，M．