植物组织培养二.ppt

第二章 组培设备及培养条件; 以工厂化生产为目的—— 了解最基本的设备条件，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室 实验室的大小取决于工作的目的和规模。实验室规模太小，则会限制生产，影响效率 在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来设计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱;第二、实验室组成： 主体设施：化学实验室、洗涤灭菌室、无菌操作室（接种室）、培养室、细胞学实验室。在无菌操作室前应带有缓冲隔离室 辅助设备：炼苗室、仓库;一、化学实验室（准备室）：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等 主要设备： 药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器 二、洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等 主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等;三、无菌操作室（接种室）：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序 主要设备：紫外线光源、超净工作台、消毒器（或酒精灯）、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）、空调器等 接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动 接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流 接种室应设有缓冲间，面积1-3m2为宜。进入无菌操作室前在此间更衣换鞋，以减少进出时把杂菌带入接种室。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌;; 四、培养室：培养室是将接种材料进行培养生长的场所。应能进行控光、控温、控湿 主要设备：有培养架（带灯管）、空调器、空气净化器、抽湿机、摇床、培养箱等 培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜，周围墙壁要求有绝热防火的性能 培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成，一般设5层，最低一层离地高约2Ocm，其他每层间隔30cm左右，培养架高1.8m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计（如采用40W日光灯，则长1.3m，30W的长lm，宽度一般为50～60cm）; 培养室最重要的因子是温度，一般保持在20～27℃左右，具备供热装置，并安装壁挂式或立式空调机（冷暖型）。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度，最好不同种类有不同的培养室 室内湿度也要求恒定，相对湿度应保持在70%～80%为好，可安装加湿器、抽湿机。 控制光照时间可安装定时开关，一般需要每天光照10～16h，也有的需要连续照明。短日照植物需要短日照条件，长日照植物需要长日照条件——现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源，这样不但可以节省能源，而且组培苗接受太阳光生长良好，驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充;;; 五、细胞学实验室：用于对培养物的观察分析与培养物的计数等 主要设备：双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等 先进设备 ——脱毒苗的鉴定成套设备 六、其他小型仪器设备：分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电磁炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等;第二节 植物组织培养的培养条件;二、环境条件;（一）温度(temperature) ;（二）光照(light) ;（三）湿度 (humidity);（四）渗透压(penetrating pressure); 电导率（EC）：指单位距离的溶液其导电能力的大小。通常以毫西门子/厘米（mS/cm）或微西门子/厘米（μS/cm）来表示： 1 mS/cm=1dS/m=1000μS/cm 电导率能反映溶液中盐分含量的高低及溶液的渗透压 电导率用电导率仪测定，现有许多便携式电导率仪供无土栽培生产之用，非常简单 注意：通过测定营养液的电导率虽然能够反映其总盐分含量，但不能够反映出营养液中各种无机盐类的盐分含量；只能通过进行个别营养元素含量的分析测定来确定营养液中各种无机盐类的含量;以电导率（EC）可与营养液浓度（g/L）、渗透压（Pa）等进行换算： EC =a+bS （a、b为直线回归系数，以各营养液配方的浓度梯度差及其相应的电导率值来计算确定） P（Pa）=0.36×105×EC（mS/cm） (换算系数0.36×105是由多次测定不同盐类溶液的渗透压与电导率得到比值的平均数) 营养液的总盐分（g/L）=1.0×EC（mS/cm） （换算系数1.0来源与上述同