羊附红细胞体体外变化规律初探研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会置第八次学术研讨会论文集 原虫部分 羊附红细胞体体外变化规律初探 秦建华杨鹏华康桂英顾小龙 摘要：采集自然感染附红细胞体羊只的血液，对羊附红细胞体在体外的变化规律进行了观察。 结果显示，在肝素、柠檬酸钠、EDTA三种抗凝剂中，柠檬酸钠溶液能使红细胞保持一定的附红细 胞体感染率。在抗凝剂中加入葡萄糖和NaHCO，，能明显改善附红细胞体的生存环境，提高感染率。 附红细胞体在抗凝荆中前12h通常总能保持旺盛的增殖率，而12h后感染率有所下降。 关键词：羊；附红细胞体；体外 ovis)寄生于 人及动物的红细胞表面、血浆及骨髓中引起的一种人畜共患传染病。主要特征为贫血、高热、黄 疸、繁殖障碍。主要发生在临产的母羊和断奶的羔羊。对宿主的年龄没有特异性，各个时期的羊 只均能感染。急性感染的羊只表现典型的临床症状，寄生严重的羊只出现溶血性贫血，造成死亡。 同时降低．机体的免疫能力，使动物容易继发感染其他疾病，是严重威胁养殖业的一种重要传染病。 本文旨在找出羊附红细胞体在体外变化的规律，为对其进一步研究打下基础。 1材料与方法 1．1实验动物 河北省廊坊市某羊场自然感染的羊只。 1．2阴性血样的制备 经镜检确定无附红细胞体感染的羊只，隔离饲养，注射免疫抑制剂地塞米松，连用7天，每 日镜检观察，最后确定无感染的羊只，颈静脉采血，柠檬酸钠抗凝，收集到离心管中，加入少许 玻璃珠，轻轻混匀，去掉纤维蛋白，备用。 1．3抗凝剂对附红细胞体感染率的影响： 感染率为10％的血样，颈静脉采血5ml，分别用上述三种抗凝剂处理，每组5个血样重复。然后分 染情况，并记录感染率，计算平均感染率。 1 4抗凝剂中营养成分的添加对附红细胞体感染率的影响： 抗凝剂分为两组，一组为添加葡萄糖(2％)、NaHc如(O．2％)的抗凝剂，另一组为不含葡萄糖、 镜检，观察各组血样的附红细胞体感染情况，并记录感染率，计算平均感染率。 1．5羊附红细胞体体外变化规律的研究： 经镜检，确定感染率为10％、50％、90％的羊只，颈静脉采血5ml抗凝，收集到离心管中，每 镜检，观察各组血样的附红细胞体感染情况，并记录感染率，计算平均感染率。 1．6混合培养对羊附红细胞体感染率的影响： 经镜检，确定感染率为10％、50％、90％的羊只，颈静脉采血5ml，加入三组抗凝剂中，每组5 8 1 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集 原虫部分 片，姬姆萨染色，镜检，观察各组血样的附红细胞体感染情况，并记录感染率，计算平均感染率。 1．7评定标准： 阳性判定：在载玻片上加一滴生理盐水，吸取少量血液加入生理盐水中，使红细胞在载玻片 上铺展成单层。1000倍镜检血片，检查20个视野中，在细胞上和血浆里只要查到一个附红体存 在，此份样本则判为阳性。 阴性判定：按上述方法压片，1000倍镜检，检查20个视野中，在细胞上和血浆里查不到附 红细胞体，此份样品判为阴性。 感染率的判定：按上述方法， 1000倍镜检，每份血样记数200个红细胞，计算感染率。 红细胞感染数 感染率= ×100％ 200 2结果 2．1抗凝剂对附红细胞体感染率的影响 经测定，在柠檬酸钠、肝素和EDTA三种抗凝剂中，附红细胞体对红细胞的感染率的变化在 前12小时并没有太大的差异，基本都能保持在一定的水平上。见图1。但是，在EDTA溶液中， 附红细胞体的感染率在18小时迅速下降，到24小时已经达到非常低的水平。在柠檬酸钠和肝素 抗凝剂中，附红细胞体的感染率在12小时均有一个小峰。在肝素中，附红细胞体在前12小时的 感染率比在柠檬酸钠溶液中的感染率高，而后有下降趋势。柠檬酸钠组中感染率始终保持在一定 的水平。说明用柠檬酸钠作抗凝剂保存效果最佳。 20 童 ∞p日h 15 +柠檬酸钠