脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠胚胎干细胞的毒性作用研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 4 符号说明 6 前言 7 第一部分脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠胚胎干细胞的直接毒性作用 9 材料与方法 ．10 结果． 16 讨论．．．… 18 第二部分脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠胚胎干细胞基因表达的影响 21 材料与方法………。 22 结果………………。 讨论…………………………………………………………………………………………………………．32 结 论……………………… 附图………． 参考文献 综述…。． 46 致谢 57 攻读学位期间发表的学术论文………………………………………………． 58 原创性声明 L■y。●III， II正S细胞增殖的影响；利用差速贴壁法纯化lI正S细胞，检测DON对细胞周期的影 信号通路基因表达的影响。 结果 1．DON对干细胞增殖的影响： 将含有不同浓度DoN的培养液加入对数生长期的IIlES细胞，继续培养24h后， 观察DON对Il正S细胞增殖的作用，结果显示：随DON浓度的增加，吸光度值逐渐 的表达量与空白对照组相比变化不明显，而当DON浓度为500n咖l时，上述基因表 对照组相比无明显变化，DON浓度为2000n酌[Ill组，可见其亮度增加，表达量增多； DON组，与空白对照组相比，其平均光密度值增加明显 SSEA-l的表达在500Il鲈Id 但无显著性差异(Pn卿。 RT-PCR检测发现500ng／ml 1000n咖l和500n卧Ill组相比，无统计学差异(Pn∞。 4．DON对Notch信号通路的影响： w色stem 实验结果说明DON影响Notch信号通路，参与Notch信号通路的转导。 结论 l-DON对mES细胞有直接毒性作用，能抑制mES细胞的生长，影响细胞周期的 分布，抑制细胞进入S期，使细胞停滞在G