辐射增敏作用机制研究——谷胱甘肽含量与辐射的关系.pdfVIP

辐射增敏作用机制研究…～ 谷胱甘肽含量与辐射的关系 孔肇路沈芝芬金一尊 复旦走毕放射医学研，t所八守 上海 2f10032 摘要：开的：观察不剧剂量v射线照射下SGC冒隙癣兰}ff胞内锌胱甘肚含量的变化。对比给予辐射增敏剂：(3S0)一一 种谷胱甘肚(GSH)合成抑制剂作用后相同照射剂量下SGC细胞中SH含量的变化，探讨含量变化的可能原闭。方法：取对 数生长期{{f|胞，分BSO用药组乖l来用药组，分别给予0、1、2、4、8Gy剂量Y射线照射，以改良TJetze还原酶法测定受照 后备时间点细胞叫|GSH含量的变化。结果：非处理组受ji}【后的细胞较宋照射组GSH含量时相变化差异显著．且呈照射剂量 依赖性增加，_|{{{射J){『给予8S0蛔巾GSH含量明显减少．且低剂量纽呈现出与0剂量组同步的变化，高剂量蛆照后存活细胞中 GSH含量变化明显不同于其它剂量纽。结论：辐j}c【前用BSO耗竭胃癌细胞内的GSH，不仅影响其辐照后细胞的存活率，细胞 内GSH含量的时耗【变化也发生了改变． 关键词：谷胱甘肚照射 丁眦亚磺酰亚胺Y一爷氪酰半胱氨酸合成酶 在用放疗对恶性肿瘤进行治疗的过程中，肿瘤对射线耐受性是妨碍疗效提高的一个重要原因，用辐射 增敏药物克服耐受性是可行的途径之一，了解肿瘤细胞辐射条件下生物学特性的变化及其内在原因将指导 我们寻找低毒高效的放疗增敏剂。内源性谷胱甘肽含量增加被认为是肿瘤抗辐射的作用机制之一”…．本 实验着眼于考察辐照剂量与肿瘤细胞存活率及存括细胞内谷胱甘肽含量变化三者间的关系以及给予GSE 合成抑制剂一丁胱亚磺酰亚胺作用后细胞内源性GSH的改变及其原因．并探讨BSO并用于放疗的可行性。 1．材料与方法： 1．I细胞 条件下培养。0．25％胰酶消化传代，实验用对数生长期的胃癌细胞。 1．2照射条件 Gammacel卜40型低剂量率研究辐射装置，使用“”csY一射线，辐照腔容积7．5升，中心最大剂量率 0．94Gy／min．实验用照射剂量分别为l，2，4，8Gy。 I．3细胞内GSH含量检测 用Tietze还原酶法””。 1．4BSO作用剂量的确定 96孔培养板，2500细胞／孔，接种48小时后加入不同浓度的药物(培养液配制的BSO溶液)培养72 小时后MTT法测定细胞生长抑制率．直线回归法推算Ic“。 2实验结果 2．1正常条件下生长的SGC7901细胞在贴壁后即刻细胞内GSH含量晟高．进入对数生长期后细胞中GSH 含量逐渐降至坪台值，如图I所示：(GSH含量值为图中值*10“／cell，下同) 2．2对照组SGC7901细胞辐照后羽小时、72小时细胞中GsH含量两次达峰且峰值呈照射剂量依赖性 增加．但第一次峰值较高(SGy组除外)，未照射组SGC细胞未见GSH含量的增高。此后，随着生长时间 的推移，GSH含量逐渐降低。如图2。 2．3 5％左右．且在长时间(实验中观察一周)内维持在此水平，但同未用BSO组～样，随着受照剂量的增加． 胞浆中GSH含量也增加，如图3所示。 图1正常生长条件下SGC7901细胞GSH含量随时间变化 图2未用药组SGC7901细胞辐照后GSH含量变化(n--6) 图3BSO用药组SGC7901细胞辊照后GSH音量变化(n--4) 2．4辐照前给予BS0．大多数情况下可以增强肿瘤细胞对射线的敏感性，如表1 表IBSO用药组与未用药组照射后存活率比较(用药组存括率，未用药组存活率) 610 3讨论 GSH是细胞自我保护系统的重要物质之一，也是DNA台成中不可缺少的小分子巯基化台物，能消 除氧自由基、维持细胞内正常的氧化还原环境和蛋白的形态与功能等多方面的作用。它广泛存在于真核细 胞中，并在胞浆中合成，仅10％左右移至线粒体中，其余均存在于胞浆中。影响GSt]合成的因素主要包括 的活性。前者主要来源于养料，而后者由重链轻链两个亚单位组成．重链决定酶的催化功能，包括氧化损 伤、细胞因子刺激、热休克、抗氧化剂、重金属离子及进入生长周期等多种因素都能引起GCS重链转录和 ／或mRNA稳定性的增加．从而反映