Hg~（2＋）对果蝇寿命和生育力及酯酶同工酶的影响.pdfVIP

第17卷第5期(2012) 寸青高旰孑拒 Vo1．17No．5(2012) Hg 对果蝇寿命和生育力及酯酶同工酶的影响 叶文斌 ，王 昱 ，何九军，杨小录 (陇南师范高等专科学校 生化系，甘肃成县 742500) 摘 要 ：采用不连续聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳方法，对不同浓度Hg对果蝇生育力、寿命和酯酶活性及其 同工酶表达的影响．结果表明：不同浓度的Hg对果蝇的生育力和寿命均有影响，产生出不同酶谱，其变化为酶 带数 、着色度、酶相对活性的不同．说明随着H 浓度的升高，果蝇的生育力降低、寿命缩短 ；果蝇幼虫体 内的 EST酶相对活性发生变化，同工酶表达受到显著的影响． 关键词 ：果蝇；H ；寿命；生育力；酯酶同工酶 中图分类号：Q38、Q965．9 文献标志码：A 文章编号：1008—9020(2012)05—024—05 汞 (Hg)是非生物必需元素，不参与生物体的结构与代谢 复，分别统计． 活动，环境中的汞可以被植物 、水生生物吸收并在体内蓄积， 1．2．2寿命测定 通过食物链进入人体蓄积于肝脏和肾脏，引发多种疾病．汞是 收集未交配的雌 、雄果蝇隔离培养．每瓶各接人50只，两 常见的重金属污染物之一，在污染的土壤 、河水、海洋和空气 种培养基各接 1O瓶(5瓶 ，5瓶6)，每天观察，记录死亡个 中有一定的含量，尤其土壤和水体被重金属汞污染后很难消 体数．以每隔 15天累计死亡数统计死亡率，并更换培养基．从 除，在我国汞污染涉及 l5个省市21个地区…，Hg2+主要来源 生育力实验中取FF，代进行寿命实验，方法同前，以比较其 于重金属冶炼、化工、农药、塑料等工业废水中的汞经雨水淋 与前者死亡率的差异． 溶冲刷而迁入水体，其化合物属于剧毒物质，可在体内蓄积2[-3]． 1．2．3酯酶同工酶分析 HgC1染毒可诱发大鼠睾丸生精细胞的凋亡，并且和无机汞 取对照和不同Hg2+~度处理的果蝇幼虫各 20只(0．01g) 所致精子数 目减少 、抑制精子发生有一定关系4[1．利用果蝇实 分别加入pH=6．8的匀浆液 IO01~L，冰浴研磨 30rain，研磨成 验检测环境物质的遗传和生物效应是一项简易快速的实验 匀浆8000～20000rm／in低温离心 20min，上清液为供试酯酶 技术，果蝇寿命是判定被检物效应的指标 ，但汞对果蝇的 (EST)酶液，取上清液25此 立即点样．采用聚丙烯酰胺凝胶 毒性试验尚未见报道．本研究以果蝇为材料 ，探讨汞污染对动 垂直板电泳 (PAGE)进行酯酶同工酶分离，分离胶浓度为 物的寿命和繁殖能力及酯酶同工酶等的影响，为合理系统的 7％，浓缩胶浓度为3．75％，电压250V，电极缓冲液为pH=8．9 研究汞对动物的遗传毒理及生物学效应提供实验依据． 的Tris一甘氨酸缓冲液，电泳4—6小时，电泳过程中温度控制 1．材料和方法 在0—3℃，电泳结束后，取出胶带立即以Or．一醋酸萘酯，B一醋酸 1．1材料 萘酯为底物，坚固蓝RR染色[8-91．当酶带清晰洗去浮色后，5％ 野生型黑腹果蝇(Drosophilamelangogaster)，购 自陕西师 冰醋酸保存固定，电泳图谱用GeneGenius凝胶成像分析系 范大学．基本培养基 ，用 250mL蒸馏水、28g玉米粉、22g蔗 统进行拍照和扫描，再用GeneTools软件进行分析并计算 糖、2．5g琼脂 、2mL丙酸、2．5g鲜酵母配制．在基本培养基中加 值 ， 值=酶带迁移距离／溴酚蓝前沿指示剂迁移距离． 入HgC12溶液 ，浓度分别为0．005mg／L、0．01mg／L、0．05mgL／、 1．2．4数据统计与分析 0．10mg／L、0．50mg／L，设基本培养基为对照(CK)． 数据用