静电场对红细胞悬液冻结特性的影响.pdfVIP

中园工程热物理学会 传热传质学 2004年学术会议 编号．04331l 静电场对红细胞悬液冻结特性的影响 陈程陶乐仁华泽钊 (上海理工大学低温生物医学与技术研究所，上海200093) Tel：021mai1：soundor@siDe．com 摘要：本文以红细胞悬液为研究模型，通过在对其进行慢速冻结的过程中引入静电场，具体研究了静 电场对降温过程中红细胞悬液冻结特性的影响。实验结果表明：静电场在一定程度上改变了冰 晶的形成与生长特性，抑制了晶核的形成，减缓了冰晶的生长速度，在较强的静电场的影响下， 冰晶明显变翘。成为块状，细胞完全融入粗大的冰晶之中，在冻结的末期。细胞不再受到冰晶 挤压，从而减少了其所受的机械性损伤。 关键词：冰晶慢速冻结静电场红细胞悬液机械性损伤 芦 1．引言 低温损伤是细胞或生物组织在低温保存的过程中砸临的重要问题之一，关于损伤机 理人们进行了大量的研究，1972年Mazur等人提出两因素假说【lj，认为冷冻损伤主要是由 两个独立的因素组成：一是胞内冰损伤，另一是溶液损伤。随着研究的深入，两因素假 究指出，冰晶在生长过程中与细胞相互间的机械作用，可能是造成冷冻损伤的叉一个因 素。Ishiguro和RubinskyI“深入考察了这种机械性损伤的机理，他们在对红细胞慢速 冻结的研究中发现，细胞所受的机械性损伤主要来自于于冰晶生长过程中的推挤，而且 部分细胞会由于纯粹的机械性损伤而消亡。 因此减少CP／t的使用量。抑制冰晶的形成，降低冰晶与细胞间相互机槭作用造成损伤 是低温生物学的重要课题。又因为水分子是一种强极性分子。存在分子电偶极矩，溶液 分子特别是水分子在受到电场力的作用时会发生扭曲或被迫形成有规贝lJ排列，这势必影 响到降温过程中冰晶形成与生长过程。考虑到水溶液的这些特点，我们尝试在低温保存 的过程中引入静电场，研究电场对低温保护剂冻结过程的影响，及电场下细胞的冷冻特 性，试图探求获得新的、更有效的低温保存方法。在我们以前的工作中，曾对强度从83kV／m 到320kV／m的高压静电场下，DW_SO与NaCl溶液降温时冰晶的生长情况，进行过初步的研究， 结果发现，电场的引入，使得原来树枝状的冰晶变得不对称，而离子型的NaCI溶液所受 的影响更为显著91。 本文则是以红细胞悬液为研究模型，通过在对其进行慢速冻结的过程中加入静电场， 具体研究了静电场对生理盐水和甘油构成的低温保护溶液。降温过程中冰晶形成与生长 的影响，以及由此而引起的冰晶与细胞间相互机械作用的变化。另外出于进行定性研究 的考虑，为了尽量减少在冻结过程中，未冻溶液中浓度梯度引起的渗透性迁移”j对冰晶与 细胞问相互作用的影响，我们选择了甘油添加浓度较小(5％(v／v))的悬液作为研究 本研究课题受国家自然科学基金重点项目(No蚤助· 拍毫 对象。而且我们关注的是静电场下，红细胞悬液降温过程中冰晶形成与生长的特征与机 理，所以仅对冻结过程进行考察。 2．试样的制备与实验方法 实验设备与方法： 为了得到实验所需的静电场环境，我们构造了如图i所示的特殊的低温样品台。两 块紫铜板作为电极，平行贴于低温样品台的两侧。高电压是利用美国GlassmanHigh Voltage Inc．公司出产的EH50P2型高压直流电源获得。该发生器的最高输出电压可达 50KV，输出功率IOOW，输出电压由高压绝缘导管导入低温样品台的高压电极板，在平行 电极间产生均匀静电场。 两电极板问的距离50mm， 故实验的最大场强可达 1000KV／m，但是在实际的