酿酒酵母细胞的共振散射光谱研究.pdfVIP

第22卷增刊 分析试验室 、’01．22Supp|． ． 2003年11月 Chinese ofAnalysisLaUraloir 2()03一11 Jomnal 酿酒酵母细胞的共振散射光谱研究 王俊，张孝恒，蔡汝秀+，林智信 (武汉大学化学与分子科学学院．武汉430072) 摘要：酿酒酵母在磷酸缓；中溶液中与培养基中都有很强的共振瑞利散射，在缓 nin、469lira、482 ntn、445nIn、457 nn3、420 冲溶液中最大散射峰在392nm处，在310 nn3、527 nIn处，在507 nrn、 衄1处也有弱的散射峰；在培养基中最大散射峰在483 541 n／n处有弱的共振散射峰。在最大散射峰处，共振散射强度与细胞浓度有良 X X 好的线性关系，线性范围分别是0—2．2106个／mL、0一1．3107个／mL，检出限 X 分别为4．7 104个／mL、1．0×10个／mL。将共振瑞利散射技术应用于检测细胞 数，具有操作简便、灵敏度高等的优点。 关键词：酿酒酵母；共振瑞利散射 F 酵母是真核单细胞生物，其细胞结构功能与其 它真核生物基本相同，由于解读了其基因组的完全 核苷酸序列而被公认为模式生物。¨。人类基因中 等一6 涉及遗传性疾病的基因与酵母基因有30％～40％ 的同源性，因此研究酵母的生命过程具有重要的意 义。现越来越多的实验证据表明：活细胞内的氧化 射分子浓度的关系，指出：在其它条件一定时，RRS 还原状态，特别是NAD+mAOH(砥)直接控制着许 强度与溶液的物质的量浓度成正比，这是共振瑞利 多生物体的重大生命过程，如细胞的节律、衰老、癌 散射作为物质浓度测定方法的定量基础。90年代 变、死亡等，建立实时动态分析方法跟踪活细胞内 的RN水平及它对上述重大生命过程的影响是分 类化合物在核酸分子上的J型堆积，显示出该方法 析化学家面l扃的一个重大的新课题。我们研究了 在研究生物分子的识别、组装、超分子排列等分析 酿酒酵母细胞的共振瑞利散射光谱，为研究酵母细 领域的应用前景。由于该方法灵敏度高，选择性 好，有广泛的应用前景。近年来，国内学者对该方 胞的衰老、死亡等生命过程与NAD+／NADH(R、)的 3发现小分子间 关系奠定基础。通常测定细胞浓度的方法有_1：① 法也产生浓厚的兴趣，刘绍璞等’9’10 染色血球计数法；②电子细胞计数法；③同位素渗 借助静电引力作用、疏水作用和电荷转移作用而形 入法；④蛋白质含量测定法；⑤比色法。每种方法