铜对肉鸡肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的影响.pdfVIP

522 第6届家畜内科学学术研讨会论文集 a等炎性细胞因子，这些因子均为内源性致热源，可作用于体温调节中枢，引起发热；②u峪与内皮 细胞相应受体结合后，通过磷酸酯酶分解二磷酸磷脂酰肌醇为三磷酸肌醇和二酰基甘油，三磷酸肌醇 和二酰基甘油再分别激活以Ca2+和蛋白激酶C(PKC)为代表的两条信号通路，引起蛋白，如细胞骨 架蛋白的磷酸化，最终导致细胞形态和粘附特性的改变，使内皮细胞屏障功能受损，通透性增加，导 致组织水肿；③刺激内皮细胞和白细胞释放一系列炎性介质(如NO、氧自由基等)，它们协同作用，改 分子大量增加，介导白细胞、中性粒细胞的粘附、聚集，引起呼吸爆发。 5．小结 综上所述，内毒素是大多数细菌引起动物发病的主要致病因子，而微血管内皮细胞是内毒素作 用的靶细胞。因此，保护微血管内皮细胞结构，改善其功能，为细菌性疾病的防治提供了一种新的 研究方法。 参考文献39篇(略) 铜对肉鸡肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的影响 曹华斌苏荣胜李和平唐兆新 (华南农业大学兽医学院临床兽医系内科学教研室510640广东广州) 摘要：铜是动物机体的必需微量元素之一。对生命体的正常生长发育起到关键性作用。为进一步了解铜对生物体 的生物学效应。我们从亚细胞结构层次的设计了本次实验。选用硫酸铜作为铜源，向即时分离的肉鸡肝脏线粒体内加入 化。结果显示：铜对线粒体膜通透性转换孔都有较显著的影响，造成线粒体不同程度的肿胀，表现为线粒体悬液在540nm 处吸光值下降。且浓度越高，吸光值下降越明显，在6min之后的吸光值下降百分比三者差异显著(pO．OS)。同样，随 着铜浓度的升高，线粒体呼吸逐渐减弱，RCR、P／O、OPR均显著降低(pO．05)o 关健词：铜线粒体线粒体膜通透性转换孔呼吸 铜是广泛分布于自然界的一种金属元素，19世纪时人们开始认识到铜对生物体的重要性，到20世 纪初铜被确认为动物体的必需微量元素之一，并在往后大量的实验研究中逐步发现，其在生物体的正 常生长发育中发挥着广泛的生物学效应。但是，其中的作用机理大部分还是基于较宏观的推断与概括， 真正的从生物细胞、亚细胞或分子水平评估铜的生物学功能在国内还是处于起步阶段，但在国外则有 着比较多的探讨与研究。许多研究发现，铜可造成生物体细胞产生活性氧的能力加强，促使体细胞DNA 的裂解，从而过早的调亡。并可加强线粒体膜通透性转换孔对其他化学物质的敏感性，造成线粒体基 质的钙超载，膜通透性增加，即而促使线粒体的肿胀、死亡。DenisM等(2002)在缺铜饮食造成动物 心肌肥厚的实验中发现：铜在心肌细胞线粒体ATP的合成过程中起到十分重要的作用，可使肼成受 阻或减少，最终影响线粒体正常的呼吸链反应，造成心肌供氧不足，影响正常的生命活动。我们的探 索就是基于国外的研究现状，使用不同剂量的铜(源于硫酸铜)，在体外对肉鸡肝脏线粒体进行直接孵 第6届家畜内科学学术研讨会论文集 523 育，观察其对线粒体膜通透性转换孔和呼吸的影响，为进一步分析铜对生物体亚细胞结构的作用提供 一定的科学数据，为深层次的探讨铜的生物学特性奠定研究基础。 1实验材料 1．1实验动物 4周龄雄性科宝肉鸡，体重1．5—2．kg，购自深圳某种鸡场。 1．2主要试荆和仪器 8500 型，上海华美)；溶氧仪(530(0型，美国Oroboms Oxy酗ph公司)o 1．3主要试剂的配制 分离缓冲液I：220mMD—Mannitol一70raMSucrose2mMHEPES—ImM BSA EGTA-0．5mg／mlpH：7．4 (KOH)；分离缓冲液II：220raMD—Mannitol-70mMSucrose-2mM HEPES-0．5rag／ridBSA，pH：7．0(KOH)； D—Mannito