Talin自抑制复合物的构象状态及力介导的激活-生物通.PDFVIP

中国科学: 生命科学 2015 年 第45 卷 第6 期: 604 ~ 613 《中国科学 》杂志社 SCIENTIA SINICA Vitae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 Talin 自抑制复合物的构象状态及力介导的激活 ①③† ①† ②③ ①③ ② ②* ①* 曾俨 , 张勇 , 宋先强 , 季庆华 , 叶盛 , 张荣光 , 娄继忠 ① 中国科学院生物物理研究所核酸生物学重点实验室, 北京 100101; ② 中国科学院生物物理研究所, 生物大分子国家重点实验室, 北京 100101; ③ 中国科学院大学生命科学学院, 北京 100049 † 同等贡献 * 联系人, E-mail: rzhang@; jlou@ 收稿日期: 2015-01-27; 接受日期: 2015-04-14 国家重点基础研究发展计划(批准号: 2014CB910202)和国家自然科学基金(批准号:资助项目 摘要 Talin 是一类位于黏着斑上连接整合素及微丝细胞骨架的蛋白, 具有承载和传递 关键词 细胞内外应力的作用. 其蛋白内部2 个结构域F3 和RS 相互作用可以形成分子内自抑制 细胞黏附 整合素 构象, 从而抑制与整合素的结合. 使用原子力显微镜测量 talin 自抑制复合物两结构域间 单分子生物物理学 的结合强度, 发现2 者键寿命随作用力呈现弱的逆锁键特性, 即在小力区间不随力的增加 分子动力学模拟 而减少, 只有当力超过一定数值(10 pN)后, 才迅速降低. 另外, 分子动力学模拟研究发现 构象变化 了另一种除该自抑制复合物晶体结构之外的稳定构象. 进一步分析显示, 外力可能会调 节这2 种构象状态间的平衡关系, 从而导致了生存几率的多重指数减小趋势. 本实验发现 了一种talin 激活的负调节机制, 为更好理解talin 在黏着斑中的作用提供了新思路. Talin(又译为踝蛋白)是一种广泛存在的胞质蛋 是连接整合素与微丝的桥梁, 还是整合素活性的调 白, 氨基酸数目超过 2500 个. 它连接整合素和肌动 节因子[10~12]和细胞与胞外基质间力的传递媒介[13~15]. 蛋白纤维、参与机械力信号传导通路、调节众多整合 研究表明, 仅有 talin 的头部就可以激活整合素, 素介导的细胞黏附事件[1]. 从结构上看, 踝蛋白可以 而黏着斑(focal adhesions, FAs) 的组装则需要全长的 分为 2 个部分: N 端的头部和 C 端的柔性长尾结构 蛋白[10]. 另一方面, 整合素在表达缺失rod 域的talin (talin-Rod). 其头部包含 FERM(four-point-one- 时活性增高[16]. 这意味着 talin 头部比全长蛋白具有 protein/ezrin/radixin/moesin)结构域, 而尾部由一系列 更强的整合素激活能力, 暗示全长 talin 可能存在一 螺旋束组成. Talin FERM 结构域通过其F3 结