第3章 光谱技术(《生物药品分析》第二版).pptx

第3章 光谱技术;紫外-可见分光光度法;电磁辐射和电磁波谱;紫外-可见吸收光谱的产生;相关的基本概念;3．生色团（发色团）：能吸收紫外-可见光的基团 有机物：具有n电子和π电子的不饱和键或基团 产生n→ π*和π→ π* 例： C＝C，C＝O，C＝N，-N＝N- ;5．红移和蓝移： 化合物结构变化或采用不同溶剂后 吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移（长移） 吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移（紫移，短移）;影响吸收带位置的主要因素： 溶剂极性和pH值 极性： n -π*跃迁：溶剂极性↑，λmax↓蓝移 π-π*跃迁：溶剂极性↑，λmax↑红移;Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律;讨论：;吸光系数和吸收光谱;2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数ε 在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度 2）百分吸光系数E 在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度;3．吸光度测量的条件选择：;偏离Beer定律的因素;（一）光学因素 ;（二）化学因素;紫外分光光度计 ;3．吸收池： 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）;仪器类型： ;2．双光束分光光度计： ;定性和定量分析;定性分析; 如果在一个试样中只要测定一种组分，且在选定的测量波长下，试样中其它组分对该组分不干扰，这种单组分的定量分析较简单。 一般有标准对照法和标准曲线法两种。 ;标准曲线法 ;外标一点法 ;荧光分析法;光致发光：吸收某种波长的光后发射出比吸收波长更长的光的现象。;荧光分析法与紫外-可见分光光度法的主要区别;单重态与三重态;激发态分子返回基态的途径;激发态→基态途径（图）;荧光和磷光的主要区别;物质分子能发射荧光的两个必要条件 ;有机化合物分子结构与荧光的关系;影响荧光的外界因素;荧光熄灭剂;种类：;硫酸奎宁在不同激发波长下的荧光(a)与拉曼光谱(b);荧光定量分析方法;比例法;邻苯二甲醛(OPA);轻罗小扇扑流萤;圆二色光谱法; 我们可以把平面偏振光(即线偏振光)看成是以相同的传播速度前进的左、右两??圆偏振光的矢量和。;平面偏振光 与 圆偏振光 的关系;圆二色光谱(Circular Dichroism,CD); 两种摩尔吸光系数之差△ε=εL-εR，是随入射偏振光的波长变化而变化的。以△ε或有关量为纵坐标，波长(通常用紫外可见光区)为横坐标，得到的图谱就叫圆二色光谱(CD)。 ;(+)-天然樟脑构型的确定; C表明其主要分布在后四区的左上区，应为正的康顿效应，而D主要分布在后四区的右上区，应为负的康顿效应，根据实验(+)-樟脑的CD和ORD谱都呈正的康顿效应，故构型应确定为A。