培养温度对马尔尼菲青霉产生玫瑰红色素的影响研究.docVIP

精品论文 参考文献 培养温度对马尔尼菲青霉产生玫瑰红色素的影响研究 文山市人民医院检验科 663000 【摘 要】目的：通过在不同温度条件下对马尔尼菲青霉菌进行培养观察，了解马尔尼菲青霉产生玫瑰红色素与培养温度的关系。方法：选取2011年1月-2015年12月期间我院血培养分离出的马尔尼菲青霉菌株，转种于沙保罗琼 脂平板上，分别于25℃、37℃进行培养后，对其菌落特征进行分析总结。结果：马尔尼菲青霉菌25℃条件下培养为霉菌相，并可产生水溶性玫瑰红色素。37℃条件下培养为酵母样菌落，无色素，但把培养基移到25℃、28℃条件下继续培养，酵母样菌落周围均迅速产生玫瑰红色素。结论：温度对马尔尼菲青霉玫瑰红色素的产生有决定性影响，室温条件下（25℃）可促使马尔尼菲青霉产生玫瑰红色素，而37℃则会抑制色素的产生。 【关键词】培养温度；马尔尼菲青霉菌；玫瑰红色素 【中图分类号】R379【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-2-102-01 1材料与方法 1. 1标本来源 20株马尔尼菲青霉菌来源于我院不同患者血液或骨髓培养分离出，所有患者HIV均为阳性。 1.2培养基 双相血培养基和厌氧血培养基均为法国生物梅里埃公司产品，沙保罗琼脂平板为自制（干粉购于杭州天和微 生物试剂有限公司）。 1.3实验方法 严格无菌技术采集患者的静脉血16-20ml，注入双相血培养基和厌氧血培养基各8-10ml，于35℃进行培养，阳性瓶转种血琼脂平板与沙保罗琼脂平 板中进行培养，严格按《全国临床检验操作规程》鉴定为马尔尼菲青霉。然后再转种沙保罗琼脂平板于25℃、37℃进行培养。开始分别于12h、18h、24h、36h、48h各观察一次菌落特征，以后每隔一天观察，连续14天。 并重点观察菌落产色素情况。 2结果 25℃生长缓慢 , 在沙保罗培养基，20株马尔尼菲青霉中最早的可于24h形成肉眼可见灰白色絮状菌落，最迟于72h形成肉眼可见菌落，随培养时间延长，菌落逐渐增大，14天时直径可达到1-1.5cm，表面平坦，呈绒毛状，初为白色，而后转为淡黄到淡红。玫瑰红色素最早于72h在菌落背面可观察到，初为淡红色，随培养时间延长，色素逐渐加深，并于5-7天后，菌落周围培养基全部变成鲜艳的玫瑰红色。 37℃中最早可于18h形成肉眼可见灰白色菌落，随培养时间延长，菌落逐渐增大，最大直径可达到0.5cm，凸起，蜡样，37℃一直培养到14天均无色素产生。但在24h后，把培养基从37℃移至25℃，20株马尔尼菲青霉均可较快产生玫瑰红色素，极大部分在30分钟内就可产生明显的玫瑰红色素，最迟产生色素的菌落在移到室温12h内产生。 3讨论 马尔尼菲青霉菌最早是1956年从竹鼠肝内分离出来的，1973年才有人类自然感染PM的首例报道，直至1984年方被证实能导致系统性真菌感染[1]。在东南亚引起的临床感染仅次于结核分枝杆菌和新生隐球菌，是引起艾滋病患者感染的主要致病菌。近年来显示逐渐成为中国AIDS患者最主要的机会性感染之一[2、3]，本次病例的马尔尼菲青霉全部分离出HIV感染患者，也证实了这一点。 马尔尼菲青霉菌是青霉菌属中惟一的温度依赖性双相菌，在25℃时呈现霉菌相，而在37℃时呈现酵母相，本次研究显示，室温（25℃）条件下，马尔尼菲青霉可产生玫瑰红色素，而37℃培养可抑制马尔尼菲青霉玫瑰红色素的产生，但恢复室温继续培养，便可迅速释放出玫瑰红色素，说明不同温度条件下培养对马尔尼菲青霉产生玫瑰红色素??重要的影响。这一特征可作为马尔尼菲青霉与其它双相真菌进行鉴别的重要要点。 参考文献 [1]VanittanakomN, CooperCRJr, FisherMC, etal. Penicillium marneffeiinfectionandrecentadvancesinthee p idemiolo gy andmolecularbiolo gyasp ects[J]. Clin Microbiol Rev, 2006, 19(1):95-110. [2]罗宏，粱伶．马尔尼菲青霉菌流行病学研究进展[J]．中国皮肤性病杂志. 2006，20（10）：627－629 [3]李凌华，唐小平，蔡卫平．101例艾滋病合并马尔尼菲青霉病的临床研究[J]．中国艾滋病性病，2008,14（1）：12-14.