副溶血性弧菌增菌培养基及培养条件的改进.pdfVIP

第 29卷第 3期 水 产 科 学 Vo1．29NO．3 2010年 3月 FISHERIES SCIENCE M ar．2010 副溶血性弧菌增菌培养基及培养条件的改进 赵广英，申科敏 ，励建荣 (浙江工商大学 食品与生物工程学院，浙江省食品安全重点实验室 ，浙江 杭州 310035) 摘 要 ：对副溶血性弧菌增菌培养基及培养条件进行 了改进和优化 ，建立一种更适用于副溶血弧菌增 菌的方法。针对能够决定副溶血弧菌综合营养需求的2个最为关键的因素：混合蛋 白胨、酵母浸膏以 及两者交互作用 ，进行试验设计 ，结合统计学软件对结果进行直观分析和方差分析 ，验证最佳培养基和 培养条件。直观分析表明，副溶血弧菌增殖过程中，混合蛋 白胨是最主要因素，其次为酵母浸膏。方差 分析表明，混合蛋 白胨与酵母浸膏对副溶血弧菌生长的影响均显著。最佳培养基配方为：混合蛋 白胨 2 (胰蛋 白胨 1％、鱼蛋 白胨 1 )、酵母浸膏0．2％、NaCI3．5％、pH8．6；最佳培养条件为：(36土1)℃ +摇床 120r／min+2层牛皮纸封 口。本优化培养基与培养条件用于副溶血弧菌增菌培养 ，在相 同培 养时间内，其增菌菌液浓度为 GB／T4789．7--2008方法的(1．8土0．6)倍 。 关键词：副溶血性弧菌；增菌培养基；正交设计；直观分析；方差分析 中图分类号 ：Q93-335 文献标识码 ：A 文章编号 ：1003-1111(2010)O3一O137一O5 副溶血性弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是一 有一定的意义。笔者以鱼蛋 白胨为基础 ，优化增菌 种广泛分布于海洋与盐湖 中的嗜盐性细菌，海产品 培养基为出发点，结合培养条件，以期建立一种副 中常有此菌[1]。食用了被副溶血弧菌污染 的生的 溶血弧菌的增菌方法 ，用于水产 品致病性副溶血弧 或未煮熟 的海产品，会导致患严重急性肠 胃炎 。在 菌的检测。 细菌性食物 中毒的构成 中，又以副溶血弧菌引起 的 1 材料与方法 急性肠 胃炎 占首位[3]。因此 ，快速灵敏的检测手 1．1 材料 段是预防控制副溶血弧菌传播的关键 。 1．1．1 试验试剂 副溶血弧菌作为水产品中主要的致病菌 ，主要 鱼蛋 白胨由宁波海浦生物科技有限公司生产 ， 以水体 中各种动物 的躯体为营养物质进行生长繁 胰蛋 白胨购 自上海 中洋海洋生物工程股份有 限公 殖。鱼蛋白胨是以新鲜海产鱼为原料 ，利用现代生 物技术生产过程 ，经酶水解、精滤、浓缩、喷雾干燥 司，均为生化试剂级 ；酵母浸膏购 自浙江省富阳市 富春江酵母厂 。 而成的一种外观呈淡黄色的粉剂，具有 肉香的特殊 1．1．2 试验菌株 气息，价格便宜，质量稳定。常作为微生物培养基 的主要原料，主要应用于抗生素、医药 、发酵 、生化 副溶血弧菌 ZJGS001由浙江工商大学食品质 量与安全实验室提供 。将菌株接种于 2216E固体 制品及微生物学科研等领域 。从构成成分上来说 ， 培养基m ，置于培养