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乳品微生物实验1 实验一 显微镜的构造和使用 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料 四、实验流程 五、实验方法 六、注意事项 七、实验作业 显微镜‘s dad 一、实验目的 1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。 2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。 3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。 二、实验原理 （一）显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合， 才能发挥显微镜的作用。 1. 显微镜的机械装置 显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗准焦螺旋、细准焦螺旋 等部件。 2.显微镜的光学系统 显微镜的光学系统由反光镜，聚光器，接物镜，接目镜 等组成，光学系统使物体放大，形成物体 放大像 。 根据物镜放大率的高低，可分为： ①低倍物镜 （10× ）； ②高倍物镜指（40× ）； ③ 油浸物镜（100× ）。 普通光学显微镜常用的目镜为10 倍平场目镜（P ）。 光学显微镜的构造 （二）显微镜的几个常用系数： ? 放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 ? 分辨率 ： 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力。 ? 数值孔径 ：也叫做镜口率（或开口率），它与显微镜的分辨力成正比，与焦深成反比，与镜 象亮度的平方根成正比。 （三）光学显微镜物镜的特性 （四）油镜使用的原理 ? 油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度 不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。 ? 加入中间的介质是一层香柏油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的 进光量，从而使物象更加清晰。 三、实验材料 1. 菌种 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、嗜热链球菌 （Streptococcus thermophilus）和德氏乳杆菌（Lactobacillus delbrueckii）染色玻片标本。 链霉菌（Streptomyces sp.）及青霉菌（Penicillium sp.）的水封片。 2. 溶液或试剂 香柏油、乙醇-乙醚混合液或二甲苯。 3. 仪器及其他用品 显微镜、擦镜纸、吸水纸等。 四、实验流程 ? 安置 ? 调光源 ? 调目镜 ? 调聚光器 ? 镜检（低倍镜 高倍镜 油镜） ? 擦镜 ? 复原 五、实验方法 （一）观察前的准备 1、显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。 2、将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。 还是准备… 3、调节光源:光源灯或反光镜→视野内的光线均匀，亮度适宜。 注：未开电源前，光源灯应呈关闭状态 4、将“10×”物镜转入光孔，将聚光器上的虹彩光圈打开到最大位置，用左眼观察目镜中视野的亮度，转动 反光镜，使视野的光照达到最明亮最均匀为止。自带光源的显微镜，可通过调节电流旋钮来调节光照强弱。 （二）低倍镜观察 ? 镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查 的位置。 ? 将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调 节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出现，再用细调 节旋钮使物像清晰为止。用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。 （三）高倍镜观察 在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。较好的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在转换物镜时要从侧 面观察，避免镜头与玻片相撞。然后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节粗调节旋钮，慢慢下降载 物台直至物像出现，再用细调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部位，并移至视野中央进行观察。 （四）油镜观察 使用油镜按下列步骤操作： 1、先用粗调节旋钮将镜筒提升（或将载物台下降）约2cm，并将高倍镜转出。 2、在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。 3、从侧面注视，用粗调节旋钮将载物台缓缓地上升，使油浸物镜浸入香柏油中，使镜头几乎与标本接触。 4、从接目镜内观察，用粗调节旋钮将载物台徐徐下降，当出现物像一闪后改用细调节旋钮调至最清晰为止。如 油镜已离开油面而仍未见到物象，必须再从侧面观察，重复上述操作。 （五）观察完后复原 ? 油镜头处理，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜纸蘸少许乙醚-乙醇混合液擦去镜头上残留油迹， 最后再用擦镜纸擦拭2~3下即可，（注意向一个方向擦拭）。