BNIP3干扰质粒的构建及鉴定.pdfVIP

下载本文档

5
0
约1.56万字
约 4页
2018-04-07 发布于北京
举报
版权申诉

BNIP3干扰质粒的构建及鉴定.pdf

1、本文档共4页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

South ·2432· 南方医科大学学报U Med Univ) 2010；30(11) BNIP3干扰质粒的构建及鉴定学教研室，广东广州510515) 3(BNIP3)干扰质粒，研究其对BNIP3蛋白表达水平的影响。方摘要：目的构建大鼠Bcl．2／EIB．19K-interactingprotein 法利用Invitrogen公司在线软件设计大鼠BNIP3(NM053420)干扰片段，合成互补的单链寡核苷酸，蒋退火后形成的的干扰质粒与大鼠BNIP3表达质粒共转染到HEK293细胞中，采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测对目的基因的干扰情况。结果构建的2个干扰质粒经测序证实序列iF确，与BNIP3表达质粒共转染后显著抑制外源性BNIP3 的mRNA和蛋白表达。结论成功构建厂大鼠BNIP3干扰质粒，为进一步研究BNIP3的功能打下了基础。关键词：BNIP3；RNA干扰：HEK293 文献标志码：A 1-2432-04 中图分类号：Q789 文章编号：1673-4254(2010)l ConstructionandidentificationofaRNAinterferenceforrat BNIP3 plasmid gene CHEN Xing-meil，LI Xiao—wenl，GAO Min91，ZHANG Bo—xin91，SUNHong-yu2,LI Tian-ming‘ of of of BasicMedicalSciences，SouthemMedical 1DepartmentNeurobiology，2DepartmentPhysiology，College 510515，China ToconstructaI矾A ratBcl-2厄1B—l and Abstract：Objecfive interferingplasmidtargeting 9K—interactingprotein3(BNIP3y assessitseffecton BNIP3 inHEK293cells．MethodsThemiRNA were exogenousexpression sequencesdesignedUSing BLOCK．iTRNAi and intodouble—strand whichwereclonedintothe Invitrogen Designersynthesized oligonucleotides． lransformationofthe intO Ecoli pcDNATM6．2，GW／EmGFP．miRvector,followedby productcompetentTopl0 cells．Atier the and of trailsformedbacteria，thewasextracted beforeitsCO．transfectionwith expansion