ALR siRNA慢病毒载体最佳干扰序列的筛选及构建.pdfVIP

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2018-04-07 发布于北京
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ALR siRNA慢病毒载体最佳干扰序列的筛选及构建.pdf

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Lab ·267· JClin 临床检验杂志2014年4月第32卷第4期Chin Sei，Apr．2014，V01．32，No．4 DOI：10．13602／j．enki．jcls．2014．04．08 ·基础实验诊断研究· 4职siRNA慢病毒载体最佳干扰序列的筛选及构建半郭虹利8，吴传新“，郭晖8，刘杞8，杨超6，孙航8(重庆医科大学附属第二医院a．病毒性肝炎研究所，b．肝胆外科，重庆400010) 摘要：目的筛选并构建肝再生增强因子(ALR)基因的最佳RNA干扰(RNA 基因表达下调后对肝癌细胞生物学特性的影响提供依据。方法针对ALR基因序列设计并合成4个siRNA靶点，酶切连接 blot检测其对目的基因ALR的敲减效率。结果酶切鉴定证实成功构建了ALRRNAi慢病毒载体及ALR基因过表达载体。不同浓度干扰质粒(0．4 Irg和0．8斗g)的western 4-0．02)均降 4-0．07，0．52 体，为后续实验奠定基础。关键词：肝再生增强因子基因；RNA干扰；慢病毒载体中图分类号：R73 文献标志码：A andconstructionoflentiviralvectorfor siRNA to Screening optimal sequencetargetingA皿gene Molecular GUO Biologyfor Hong．1i8，形uChuan—xin6，GUOHui。，ⅡuQi4，YANGCha06，SUNHan94(U．KeyLaboratoryof Infectious DiseasesResearchandTreatment Diseases，Ministry Center，b．DepartmentofHepatobiliarySurgery，theSecondafill- ofEducation，Liver iated Medical HospitalofChongqingUniversi@，Chongqing400010，China) of to ofliver ToscreenandconstructalentiviralvectormosteffectivesiRNA Abstract：Objective targetingaugmenterregeneration ALR Oil charactersof for toolto theeffectof of (A衄)geneprovidingpowerfulinvestigate down—regulationgeneexpressi