甲氨蝶呤.ppt

公司 徽标 甲氨蝶呤(methotrexate，MTX) 汇报人：李宏斌 汇报内容 1. 甲氨蝶呤理化性质 2. 甲氨蝶呤的细胞毒作用 3. 实验设计 甲氨蝶呤理化性质 分子式：C20H22N8O5分子量：454.44性质：熔点195°C。水溶性Insoluble. 0.1 g/100 mL at 19°C 性状：橙黄色结晶粉末。 溶解情况：微溶于水。几乎不溶于乙醚、乙醇、氯仿。用途：抗叶酸制剂，为基本抗肿瘤药物。系联合化疗方案中常用的周期特异性药物。用于急性白血病，绒毛膜上皮癌等。制备或来源：由6-溴甲基喋呤与对甲氨基苯甲酰麸氨酸缩合而得。 [1].[5]. 分子结构： 甲氨蝶呤主要作用[1] 1 MTX的细胞毒（抑制肿瘤）作用 2 MTX通过腺苷诱导免疫抑制作用 3 MTX抑制免疫炎症细胞增生及诱导凋亡 4 MTX影响细胞因子及其拮抗剂 5 抑制中性粒细胞的趋化作用 6 MTX对环氧化酶及脂氧化酶的作用 7 MTX对蛋白水解酶及其抑制物的作用 2.叶酸的作用[5]. 叶酸的活化形式四氢叶酸是体内一碳单位转移酶的辅酶，分子中N5,N10是一碳单位的结合位点，一碳单位在体内参加嘌呤，胸腺嘧啶核苷酸等多种物质的合成。叶酸缺少时，核酸的合成受到抑制。 二氢叶酸合成酶 蝶酸-L-谷氨酸羧基肽酶 二氢叶酸还原酶 小肠粘膜上 皮细胞 叶酸（蝶酰多谷氨酸 ） 蝶酰单谷氨酸 四氢叶酸 二氢叶酸 3.活化过程[5]. MTX可以看做是由叶酸中蝶啶基中的羟基被氨基取代后的叶酸衍生物[5]. MTX是二氢叶酸还原酶的抑制剂(为叶酸的拮抗剂，和二氢叶酸还原酶的亲和力比二氢叶酸强1000倍）。阻止二氢叶酸还原为活化的四氢叶酸，使胸腺嘧啶核苷酸和嘌呤核苷酸的合成原料耗竭，抑制DNA和RNA的合成，从而抑制细胞的增生和复制，起到细胞毒作用。 [1]. [4]. 1.叶酸 2.蝶酰单 谷氨酸 3.二氢叶酸 5.四氢叶酸 4.二氢叶酸 还原酶 MTX × 实验设计 一、问题的提出 1.甲氨蝶呤对于体外培养的细胞是否有明显的细胞毒抑制作用. 2.作用细胞的有效浓度. 二、实验过程 1.甲氨蝶呤溶解 查阅文献，参考相关实验确定溶解药物的方案。由于文献所用甲氨蝶呤多为甲氨蝶呤的注射液,且实验多为动物实验。可以直接用注射水溶解（或生理盐水），对于原药的溶解，国家药典说明可以溶于盐酸，但低PH不于细胞培养，查阅相关公司产品，并经过试验，确定原药可以溶解于DMSO。 2.浓度设计 母液配制：称取4.5mg MTX溶于1ml 100%DMSO,稀释至10ml.即 MTX浓度为1mmol/L,DMSO浓度为10%。 稀释：将母液分别稀释至药物浓度为10μmol/L 1μmol/L 0.1μmol/L，对应DMSO浓度为0.1%0，0.01%,0.001%. 为了排除DMSO本身对细胞的作用，另设置一对照为空白对照。