RNA干扰白细胞抗原-G增强自然杀伤细胞对肝癌的免疫监视.pdfVIP

生堡塞验处昼苤查!Q塑至!旦筮堑益笠!期￡丛!』垦塑!坚珞，垒!矬12Q堕：!!!：!鱼：盟!：§ ·月干脏夕b乖,4-· RNA干扰白细胞抗原一G增强自然杀伤 细胞对肝癌的免疫监视 0 曾宪成 张彤 李华 方天翎 聂常富 蔡常洁杨扬 陆敏强 陈规划 【摘要】 目的构建表达人类白细胞抗原．G(HLA．G)基因shRNA载体，探讨其对自然杀伤 细胞(NK)细胞杀伤效应的影响。方法构建4个HLA—G-shRNA真核表达质粒，转染至Huh7细 胞。检测HLA．GmRNA及蛋白质水平的表达。将NK-92MI细胞与靶细胞共同培养，以LDH释放 法观察不同效靶比时NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤效应。结果经酶切及测序鉴定证实，插入序 列与设计的序列相符。RealTime-PCR和Western—blot结果均表明重组载体抑制了Huh7细胞HLA· G基因的表达。NK-92MI细胞对转染HLA—G的shRNA的Huh7细胞杀伤作用明显升高(P 0．01)。封闭NK-92MI细胞ILT2受体后，杀伤作用降低(P0．01)。结论HLA-GshRNA可以增强