利用RNA干扰阻抑膀胱癌细胞Survivin基因表达和诱导凋亡.pdfVIP

· · 1174 ·膀胱肿瘤· 利用RNA干扰阻抑膀胱癌细胞Survivin 基因表达和诱导凋亡 王小林侯建全温端改何军 岑建农谷敏 【摘要】 目的探讨RNA干扰下调suⅣivin基因表达后膀胱癌细胞生物学行为变化及sur— vivin基因抗凋亡机制。方法设计、合成一对Survivin编码基因序列特异的小分子干扰RNA(siR— NA)，用脂质体包裹转染T24膀胱癌细胞，分不同的浓度组(50～200nmol／L)。噻唑蓝(MTT)法检 测细胞生长情况，流式细胞仪测定细胞凋亡率，实时定量聚合酶链反应(PCR)检测Survivin基因和 Caspas}3基因mRNA表达。结果Survivin编码基因序列特异性siRNA能有效下调Survivin基因 表达水平，并呈剂量和时间依赖性，最大效应浓度为100nmol／L，此时与对照比较Survivin表达水 平下调75．91％，并显著的抑制了细胞生长，抑制率达55．29％，差异有统计学意义(PO．05)。同 时，Caspase一3mRNA表达水平明显上升达239．80％，细胞凋亡率亦增加至45．70％，与对照相比差 异有统计学意义(P0．05)。结论RNA干扰显著下调survivin基因表达后，能明显促进配4膀胱 癌细胞凋亡并抑制其增殖；Survivin基因可能是通过下调Caspase一3表达来抑制凋亡。 【关键词】RNA干扰；膀胱肿瘤；Survivin；脱噬作用；信号转导 KnockdownOfSurvivin withRNAillterferenceinducesbIaddercarcinomaceIls expressiml apoptosis W4NG R搿t Xi口o-Zi咒。，HOU’，如，王一g“n咒，WEND“口，z一班i，以以．’D哆n以me规fo，Ur020昌y，丁heA所Z一 缸fed f如s声i￡口￡o厂S00c^o让，Lki御rsifv，S“2厩o“215006，China I!为r，。es声o，耐i7zg口“￡_}lor：HOU-r妇n一口“口咒 To theinfluencetothe behaviorofbladdercancer 【Abstr孔t】0bj∞tiveinvestigate biOlogical ceIISafter ofSurvivinandthe mechanismsofSur、，ivin．Menlods0he downreguJation anti—apoptotic paif ofSurvivin small and targetSequence—specificinterferingRNA(siRNA)wasdesignedsynthesized，then wasusedtotransfectbladdercancercellline—T24with concentra— siRNA／Hposomecomplex increasing MTT the ofT24cellswas ratewas tions(50一200nmol／L)．Byusing aSsayproliferation teSted．Apoptosis flow of mRNA wasde— evaluatedby cytometricanalysis．TheexpreSsionSurvivin an