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SouthMedUniv)
．1088· 南方医科大学学报(J 2012；32(8)
。劫出研茕
利用慢病毒载体构建稳定干扰p．catenin的人胚胎千细胞系
孙懿，曾思聪，卢光骑，林戈
中南大学生殖与干细胞工程研究所／／人类干细胞国家工程研究中心／／卫生部人类干细胞与生殖工程重点实验
室，湖南长沙4l0078
细胞293FT制备重组慢病毒，并感染人胚胎干细胞．采用嘌呤霉素筛选稳定表达sh9一cacenin人胚胎干细胞克隆；试验分为稳定
毒感染人胚胎干细胞后。获得稳定表达shD．catenin的^、胚眙干细胞系，Sh9-catenin组13-cateninmRNA表达明显降低，只有WT组
表达，但表达多能性标记OCT4。结论通过p．catenin特异性shRNA’陧病毒载体构建了稳定干扰p-catenin的人胚胎干细胞系。
关键词：人胚胎十细胞；RNA干扰；B-catenin
1 文章编号：1673-4254(2012)08-1088-05
中圈分类号：Q291；Q813文献标志码：A
dot：10
3969(i．issn．1673-4254．2012．08．04http：／／www．cnki．net／kems／detail／44，1627．R1058．016．html
stem with
Establishmentofahuman cellline stable silencingby
embryonic p-catenin
shRNAlentivirus
SUN Ge
Yi,ZENG
Sicong,LUGuangxiu，LIN
Institute andStemCell South Researchand Center
ofReproductiveEngineering,CentralUniversity；NationalEngineeringofHuman
Stem StemCellsand 410078，China
Cells；脚LaboratoryofHuman ReproductiveEngineering,MinistryofHealth，Changsha
estabHshahuman cell1inewith lentlvirus-medtared
To stem B—catenin
Abstract：Objective embryonic stably genesilencingby
lentivirus
shRNAinterferenceMethods vector,a 0-catenJnshRNA，was
PLKO．1一puro-f3-cateninplasmidexpressing packaged
hto293FTcellsHtlman stemceilswereinfectedwiththelentivirusandthecellclones
embwomc stablyexpressing侈一catenm
shRNAwereselected theuninfectedcellsandcellsinfect
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