果蝇杂交实验模板.doc

实验五　　果蝇杂交实验 一、实验目的与要求 了解伴性遗传和非伴性遗传的区别，以及了解伴性基因在正反杂交中的差异，理解遗传规律。 二、实验类型 本实验为设计型实验。 三、实验原理及说明 基因的颗粒性遗传是孟德而尔遗传学定律的精髓，两对处于不同染色体上的基因决定两对相对性状的遗传遵循孟德尔定律。 常染色体上的基因遗传时，性状分离在雌雄两性中有同样的表现。性染色体上的一对等位基因伴随性染色体遗传，其性状遗传与性别相联系。处于同一染色体上的连锁基因可以发生一定频率的重组，重组值的大小反映基因在染色体上的相对距离。三点测交就是通过一组杂交对三队连锁基因的交换行为进行测定，以确定其在染色体上的相对位置和排列顺序的最经典的实验。 这些规律的验证可以分别进行，也可以通过不同突变体的合理组合有所侧重。如伴性遗传基因分离图解： A： B： ♀X+X+ × XwY♂ ♀XwXw × X+Y♂ 红眼 白眼 白眼 红眼 F1 F1 ♂ Xw Y ♂ X+ Y ♀ ♀ X+ X+Xw X+Y Xw X+Xw XwY ♀红 ♂红 ♀红 ♂白 实验说明：vg位于第二号染色体，e位于第三号染色体，w sn3 m位于X染色体。 从图解得知，以显性个体作杂交组合的母本时，F1代和非伴性遗传相同，若以隐性个体作杂交组合母本时F1代中的雄性表现为隐性性状。 四、实验仪器 序号 仪器名称 台数 1 双筒解剖镜 20 2 培养箱 2 五、实验内容和步骤 1.实验准备： （1）用具 牛奶瓶，麻醉瓶，磁板，海绵板，解剖针，毛笔，镊子，解剖镜，死蝇收集瓶，吸虫管，口曲纸，解剖针， 普通果蝇的两个品系：野生型果蝇（+），白眼果蝇（w），残翅果蝇（vg），黑檀体果蝇（e），白眼、卷刚毛、小翅果蝇（w sn3 m）。（说明：vg位于第二号染色体，e位于第三号染色体，w sn3 m位于X染色体。） （2）药品：乙醚，0.75NaCl 2.实验步骤： 第一周：学生根据实验材料自己确定实验方案，可以任选其中1-2个杂交组合。 选取每组实验所要用的各种果蝇表型作为亲本进行杂交。每个杂交都做正反交。 ②贞蝇的鉴别与挑选和收集。每组至少挑选5-10只贞蝇。新羽化的雌身体细长，幼嫩的几乎透明，一般在8-10h没有交配能力，或经过7-10天的隔离饲养没有与任何雄蝇交配过的蝇都属于处女蝇。 挑选处女蝇的方法：将亲本培养瓶中的成蝇全部依走（可在晚上22：00至23：00期间将成蝇移入另一个培养瓶中，次日早晨8：00至9：00对新羽化的果蝇进行进行挑选）。以后每隔6-8h观察一次，并将新羽化的雌雄成虫取出并分别放入培养瓶内备用。新羽化的雌身体细长，幼嫩的几乎透明，一般在8-10h没有交配能力，属于处女蝇。。 ③杂交接种的步骤：Ⅰ接种：把选出的雌雄果蝇，根据杂交实验组合的要求分别搭配起来，装入一个培养瓶内，每瓶放5—6对，贴上标签，写明杂交组合的亲本、杂交日期、实验者姓名。Ⅱ培养：第二天检查培养瓶，亲蝇若有死亡应及时补充，将培养瓶放在25℃恒温培养箱中培养。注意随时检查培养基是否发霉，如有污染应立即更换新的培养基。 第二周：对果蝇生活史进行细心观察，并书写观察日记，记录你所看到的果蝇的行为，各发育阶段的主要现象及经历所需的时间等。 ①淘汰亲本果蝇：第一周接种的亲蝇，经7-8天培养后，再过3-4天，F1代将孵出，为避免亲子蝇混淆，应将亲蝇放飞或将其移到死蝇瓶中。即当瓶壁上出现黑色蛹时，在实验室移去亲本，之后继续将培养瓶存放在恒温箱内保存。 ②配制培养基： 在接下来的一周中，将F1移入新的培养瓶中进行兄妹交，因此需要配制新的培养基。 ③设计测交实验： 通过测交实验以验证F1的基因型。测交实验须用隐性亲本的处女蝇。收集隐性亲本的处女蝇，以备下一周使用，请写出你自己设计的实验流程及相应的记录表 第三周： ①观察记录F1表型：再经3~5天（即接种杂交亲本后的约11~12天），F1成虫开始羽化，在实验室中取出F1成蝇，观察记录其表型和数量。每个杂交组合至少应统计30只。 ②F1兄妹交：取一新培养瓶，放10~15对F1果蝇（这里的雌蝇无须是贞蝇，为什么？），③进行F1自交。贴好标签，写明F1的基因型、杂交日期、实验者姓名。 测交：将隐性亲本的处女蝇与F1杂交，做测交实验。 第四周： 7~8天后，移去F1兄妹交（自交）的个体。 第五周： ①再过3~5天即接种F1果蝇11~12天后，F2开始羽化。在实验室中逐批仔细观察各种表型并计数，