新霉素研究进展.pptVIP

新霉素 neomycin 定义 结构 产生新霉素的菌种 新霉素的生物合成 新霉素的检测方法 应用 定义 新霉素是首个被发现的2—DOS (2—脱氧链霉胺) 氨基糖苷类抗生素, 它是1949 年Waksman 等从弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)代谢产物中分离得到的一种氨基环多醇复合抗生素。新霉素能引起细菌蛋白质合成时mRNA读框的变化，但其在核糖体上的作用靶点与链霉素不同。 结构 新霉素含有化学结构与生物活性不相近的A、B、C 3 种,主要成分为新霉素B 和C ,新霉素A 仅微量,是新霉素B、C 的降解产物之一. 新霉素结构中含有较多- NH2 功能基团,研究表明, - NH2 越多活性越强. 新霉素结构见图1. 新霉素化学结构 生物合成途径 氨基糖苷类抗生素生物合成基因的片段往往较大且具有多样性，从而对其克隆测序和通过突变子确定独立基因及它们的功能造成很大难度； 其次，氨基糖苷类抗生素种类多、结构复杂且来源广泛。不过现有的氨基糖苷类抗生素生物合成途径的研究已经揭示，在不同的氨基糖苷类抗生素产生菌中具有相似的合成过程。 生物合成途径 新霉素含有核糖霉素结构。 核糖霉素为新霉素生物合成途径的中间产物。 新霉素生物合成途径见图2 (大括号中为Neo-11 ,Neo-18 及其同系物催化的反应) . 生物合成途径 以上合成路径中，从6-磷酸葡萄糖(1) 合成2-脱氧链霉胺(2) 已进行了大量表征。2-DOS(2) 被认为是通过添加初级代谢产物N-乙酰葡糖胺而转化为新霉胺。巴龙霉胺(5) 通过连续的脱氢作用和吡哆醛-5′-磷酸为基础的氨基转移反应转化为新霉胺(7) 。 路径的剩余部分，从新霉胺(7) 到核糖霉素(8) 以及从核糖霉素(8) 到新霉素(11 + 12) 仍有待进一步研究验证。 新霉素生物合成基因簇包括推断的两个脱氢酶基因(neo-5 和neo-11) 和两个氨基转移酶基因( neo-6和neo-18) ,它们在布罗替星及核糖霉素生物合成基因簇中都为同系物。在2-DOS 的生物合成中,脱氢作用被NeoA (Neo5) 催化. Neo-6 ( neoB) 的基因产物和其同系物bt rR(bt rS) 已通过体外证明在2-DOS 生物合成中具有氨基转移酶及催化氨基转移步骤的双重作用。 　新霉素检测方法 　生物法 新霉素的微生物检测—管碟法. 优点:灵敏度高,微量级的新霉素即可检测出.通过利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,采用量反应平行线原理的设计,比较标准品与供试品二者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价. 缺点：要求严格、烦琐,影响因素较多。 不过随着设备自动化程度的提高,此法准确性也得到进一步改善,不过随着新技术的发展,此法也将逐步被其他方法取代. 　化学法 与微生物方法比较,化学方法简便、快速,易于操作,设备简单,可作为企业中成品的快速分析及质量监控的参考方法,且一般较适用于纯品的检测. 当前检测新霉素的化学方法包括旋光法、比色测定、色谱及联用技术等. 　旋光法 测定基于新霉素为两性电解质,通过旋光仪测定其旋光度,得到旋光度对浓度的标准曲线,再通过样品旋光度对应得样品浓度. 　比色法 原理是通过新霉素在碱性条件下与Cu2 + 形成蓝色复合物,且有稳定的光吸收,从而对新霉素含量进行测定. 色谱法 薄层色谱( TLC) ：各国药典广泛采用TLC 定性检测氨基糖苷类抗生素,此法具有使用范围广,样品预处理简单,优化展开剂的组成方便等优点。 高效液相色谱( HPLC)：HPLC 因其专一性和灵敏度高已广泛应用于药代动力学及药物的稳定性研究. HPLC 测定新霉素含量大多采用反相色谱系统。 应用 起初试验发现新霉素可以处理治疗对其他化学治疗剂有抗性的细菌引起的病例,但由于其组分中不可分离的有毒物质限制了其在临床上的广泛使用. 随着对其的深入研究,新霉素被重新考虑为较好的外用抗生素,由于其局部应用很少引起毒性反应或过敏性反应,常用于治疗皮肤感染性疾病. 应用 后来研究人员针对新霉素软膏的油腻、亲水性差,药物释放差等缺点,将其与卡波姆为主要成分配制成新霉素凝胶制剂,克服了以上缺点,在临床上取得了较好效果。 由于新霉素内服极少吸收,在肠道内浓度很高,所以与其他抗生素混合口服可用于对肠道微生物群系的控制,适合于手术前的肠道消毒等。 应用研究 美国哈佛大学医学院的胡国孚近期研究发现,常用的抗菌药物新霉素能干扰血管的形成, 新霉素以一种特别有效的方法几乎完全阻止了新生动脉的形成过程:它阻遏了两种成纤维生长因子( FGF)和内皮生长因子,而这些因子都是参与启动血管生长过程的重要化合物，可能是治疗癌症的有效药物。 在兽药临床上,新霉素是治疗畜禽细菌肠炎的首选药物之一. 兽用新霉素给药途径较多,不过现在普遍