花生根瘤菌高效菌株的筛选及固氮效果研讨.pdfVIP

嘎rjI淑—r童r高效—r糠的筛嗣lA嘲囊0藏—H开究 土壤生物与生物化学 花生根瘤菌高效菌株的筛选及固氮效果研究 吴海燕，刘春光，张桂芝，孙淑荣 (吉林省农业科学院土壤肥料研究所，吉林公主岭136100) 摘要：本文以吉林省扶余县三井子镇沙壤土为供试土壤，通过对花生根瘤菌的采集、菌株的分离、纯化和服寄主品种的阐 的固氮活性，修正了花生根瘤菌无快生型或快生型固氮活性低的传统说法。同时这3种优良菌株中2种或2种以上组合接种效果更 佳，是生产上推广应用的优选菌株。这为引进优良菌种、组合接菌提供了理论依据。 关键词：花生根瘸菌；优良菌株；固氮酶活性：盆栽试验 关于吉林省大豆种植老区土著大豆根瘤菌的生态学特性及接种效果，我们已经作了较为深入的研究，取得 了一些研究成果。而花生现作为我国主要的油、粮两用作物，是营养比较全面的植物性食品11l，年产达一千多万 吨。花生根瘤菌也如同大豆～大豆根瘤菌共生体系一样，通过有效的共生固氮作用，可提供花生生育期中所需 氮索的I／2左右12}。但这种共生固氮作用并不能完全保证发挥最大效果，往往是新种植花生的土壤中不含有有效 的根瘤菌或者含量很少，土壤中无效的根瘤菌在花生根部结瘤，其固氮效率很低。人工接种优良菌种可以保证 形成大量有效根瘤，充分发挥共生固氮作用13l。我国早在上擞纪40年代末就开始了花生根瘤菌的选育研究工 作，国内多家单位在菌种的筛选、保藏条件、菌剂生产工艺，田间应用条件等方面进行了大量的研究HI，结果表 明花生根瘤菌有着比大豆根瘤菌更强的抗旱能力，具有一定的发展潜力。因此通过对花生根瘤菌的采集、菌株 的分离和纯化以及对原寄主品种的回接等盆栽试验，选择长势、瘤数、瘤重和固氮酶活性以及产量等表现优异 的菌株为优良高效菌株，筛选出菌种与寄主之间的最佳组合，达到人工接种增产的目的，从而为合理施用氮索 化肥又能充分利用固氮作用达到高产提供依据。 l材料与方法 1．1不同花生根瘤茵对花生生育性状影响的盆栽试验 供试地点：试验地点设在扶余县三井子镇，供试土壤为沙壤土。耕层混合土壤样品的理化性状戈． pH8．0、全氮1．449／kg、碱解氮l 速效钾(K20)100．3mg／kg。 供试作物：花生(吕花l号、小四粒红) 供试菌株：试验菌株为引自全国各地的花生根瘤，其菌株代号及菌株来源分别为009、PGPR、钾细菌(由 山东省农科院提供)、 一124～ j；壤生物与奠渊●化-鼍p 薏奠；棚‘，■—r龠效—r株的筛选及圈氮效果研究 盆)，其余处理氮肥用量相同(尿素5石g，盆)。 播种，每盆播3粒(3穴)，花生出第3片叶后定苗，每盆留l株。 试验菌株用试管斜面移接好，用无菌水冲洗后，用接种环无菌操作刮入层灭菌的三角瓶内，用玻璃球将菌 充分打开，播种时用花生种子在菌液上充分滚动，接匀、播下，每一粒种子的接种量为l07活细胞。 菌数，s一种子的平均重量，W一用100mi接种刹悬浮液处理的种子重量。 播种60d后(9月17日)进行收获，同时进行结瘤数、固氮酶活性、瘤干重和植株地上部干重的测定。 I．2优选菌株2644、2656、2697生理生化特性鉴定 采用“一般细菌常用鉴定方法州“7J进行。 1．3花生生育期间根瘤茵固氮酶活性的测定和固氮量的估测 1．3．1 固氮酶活性的测定在盆栽条件下，在不同生育期挖取以根系为中心的30cm3土柱3株，将带瘤根系 量。用纯乙烯标准曲线计算之。 1．3．2 固氮量估测结瘤花生的氮素来源为土壤、肥料和固定的氮，不结瘤花生的氮素来源为土壤和肥料供 应，因此用结瘤花生植株全氮减去不结瘸花生植株全氮可得花生根瘤菌的围氮量。 2结果与讨论 2．1优选菌株对花生生育性状影响结果比较分析 9月17日，对2个品种的花生进行收获，其生育性状调查与测定结果列于表1、表3。 从表1结果看出，从全国各地筛选的花生根瘤菌对我省主要花生品种进行接种，无论结瘤数、瘤干重、固 氮酶活性，还是地上部植株干重，都因菌种不同而影响不尽相同。在吕花1号花生品种上，表现最好韵是2644 我们对植株地上部分每株植株干重进行了方差分析，其结果见表2，结果表明，处理间差异极显著，重复 显著。说明，在吕花一号花生品种上以2644+2656组合接菌表现较为突出。 对