蛋白质芯片及其分析应用新进展.PDFVIP

第# 卷 分析化学 （Q3+RS /TPRT3 ）! 评述与进展 第 期 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! $$ 年 月 58699 U,F:DC ,V PDC?@6GDC 589A6@:? 4 % !!!!!!! ! ! 评述与进展! ! !!!!!!! 蛋白质芯片及其分析应用新进展 梁建功! 何治柯# （武汉大学化学与分子科学学院，武汉#$$% ） 摘! 要! 蛋白质芯片是一种快速、高效、高通量的蛋白质组研究新技术。目前，它已成为人们研究的热点之 一。本文就近年来蛋白质芯片及其分析应用新进展做一简要的评述。 关键词! 蛋白质芯片，蛋白质阵列，蛋白质微阵列，检测，评述 ! 引 言 随着人类基因组计划（/01 ）的顺利完成及后基因时代的到来，蛋白质组的研究已经成为生命科学 ［)］ 的一个重要领域 。蛋白质组传统的研究方法有：二维凝胶电泳（23 ）和酵母双杂交技术等。但这些 ［ ］ 方法往往操作烦琐，所需时间较长，结果具有不确定性，且所需费用较高 。因而，人们发展了一种快 速、高效、高通量的蛋白质组研究新技术———蛋白质芯片。 蛋白质芯片又称蛋白质阵列或蛋白质微阵列，它是将大量的蛋白质、蛋白质检测试剂或检测探针以 预先设计的方式固定在玻片、硅片及纤维膜等固定载体上组成密集的阵列，能够高通量地测定蛋白质的 生物活性，蛋白质与大分子和小分子的相互作用，或者用于高通量定性和定量检测蛋白质［# 4 % ］。近年 来，蛋白质芯片已成为人们研究的热点之一。本文就近年来蛋白质芯片及其相关检测技术的研究进展 做一简要评述。 # 蛋白质芯片的分类 ［* ］ 蛋白质芯片，主要有# 种分类方法：（) ）56789:;9 =6,?@9A 公司 提出将蛋白质芯片分为化学芯 片和生物芯片。化学型蛋白质芯片的构想来源于经典色谱法（反相层析、离子交换层析、金属螯合层析 等）。铺有相关介质的蛋白质芯片可以通过介质的疏水力、静电力、共价键等结合样品中的蛋白质，用 洗脱液去除杂质蛋白质，而保留感兴趣的蛋白质。生物型蛋白质芯片则是将生物活性分子（如：抗体、 抗原、受体或配体等）结合到芯片表面，用于捕获靶蛋白；（ ［ ，B ］ ）根据载体的不同 ，将蛋白质芯片分为 普通玻璃载体芯片（7CD6’;CD C6E9 ）、多孔凝胶覆盖芯片（7,:,F ;9C 7DE G867 ）及微孔芯片（A6G:,H9CC G867 ）；（# ）I,EDE9J［)$ ］提出将蛋白质芯片分为蛋白质功能芯片和蛋白质检测芯片。蛋白质功能芯片是 在一特定模板上固定成千上万个蛋白质分子，用于蛋白质功能的研究；而蛋白质检测芯片则含有蛋白 质检测试剂，用于蛋白质的定性、定量测定。 $ 蛋白质芯片的制备 $ - ! 蛋白质功能芯片的制备 在蛋白质功能芯片的制备中，纤维膜（如：硝酸纤维、尼龙、聚偏二氟乙烯等）和经过修饰的玻璃表 面是较为理想的芯片表面。KDGL9D@8 和MG8:96L9:［))］将载玻片表面用羰基硅烷化试剂处理后，用机器人 将含$N 甘油的纳升级蛋白质样品点在载玻片上，形成直径约).$ 4 $$ !A 高密排列的蛋白质阵列 （)($$ 点O GA ），最后用牛血清蛋白（=PM ）进行封闭，降低膜上背景。在研究多肽和小分子蛋白样品时， $$’$(’$% 收稿；$$#’$’)* 接受 本文系国家自然科学基金资助项目（+,- $%.$* ） 第% 期 梁建功等：蛋白质芯片及其分析应用新进展