益生菌对一些致病菌抑制作用的研讨.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次全团发酵工程学术讨论奢论文集 益生菌对一些致病菌抑制作用的研究 于海，邢锋锋，汪志君 (扬州大学食品科学与工程学院，扬州225001) 擅耍：丰文的主要内容是研究从市譬的破奶中筛选得到的五株乳杆菌对大膊杆菌，涉门 氏酋及幽门蜱麓杆菌的抑制作用。实验的结果显示．37℃恒温培养24小时。五椿乳杆苗在 大肠杆菌、涉几氏菌厦幽门螺旋杆菌的培养基上均产生大小不同的抑酋圈，通过对抑制田直 径的测定及观察，发现其中一株乳杆菌(YD2517)对三者致病菌的抑制作用蕞强，并明显强 干对照苗(YD2410)． 关键阕：乳杆蕾I大膀杆菌；沙门氏菌I幽门螺旋杆苗I抑制作用 前言 人体内的肠道茵群在一定情况下可危害人体健康，即若肠道菌群平衡失调，则对人 体有益的菌群明显减少而影响人体的正常机能，或是对人体有害的病源菌相当活跃，在 肠道内大量繁殖，释放毒索，破坏机体组织，引起肠道功能紊乱，从而使人出现种种病 态．如大肠杆菌可导致人腹泻；幽门螺旋杆菌，易引起慢性胃炎和消化性溃疡；沙门氏菌 感染后可引起急性胃肠炎等疾病。 益生菌最早由梅契尼柯夫在1907年提出的发酵乳制品有助于健康长寿的理论发展 而来的，而益生菌的定义是在1965年由Lilly提出的，指对饲养动物肠道菌平衡有益的 促进物或微生物。之后关于益生菌的概念不断完善，现代的益生菌的定义是由Guarmer 于1998年提出的，指。当摄人一定量时对宿主健康有作用的微生物深入活体“。 益生菌是一类活的微生物，主要是作为肠道内固有菌群的补充，以帮助机体消化和 防止有害微生物的过度生长，起到促进机体健康的作用。 本文主要研究通过从市售的酸奶中筛选得到的一株乳杆菌对对大肠杆菌、沙门氏菌 及幽门螺旋杆菌的抑制作用。 1材料与方法 1．1菌株 对照菌株lYD2410(Hansen公司) 致病性大肠杆菌YY-21由医学院提供 幽门螺旋杆菌11637(中国疾病预防控制中心) 沙门氏菌由扬大生技学院提供 1．2培养基 于海等：益生苗对一些致病菌抑制作用的研究 吐温80 15分钟。 121℃，灭菌15分钟。 2．6，蒸馏水1000，调pH7．4。 pH7．4。 1．3乳杆菌浓度的测定 1．4致病性大肠杆菌殛沙门氏菌 将大肠秆菌及沙门氏菌接种于营养肉汤中，37C培养18h后，传2～3代。平板计数 法计活菌数。控制其活菌数在10‘efu／ml，此浓度易致病。 1．5幽门螺旋杆菌 将冻融后的幽门螺旋杆菌接人Skirrow氏培养基表面，置于密封罐年37℃培养，抽 成真空，充人Coz及M。 1．6对致病菌抑制作用的测定 1．6．1对大肠杆菌的抑制作用 分别吸取乳杆菌菌液、大肠杆菌的菌液ImL于无菌试管中，加人MRS液体培养基 红美兰培养基计数其中大肠杆菌的活菌数。 1．6．2对沙门氏菌的抑制作用 抑菌性能观察：吸取活化好的沙门氏菌菌液lmL在营养琼脂培养基上均匀涂开， 照，三次重复。 感；直径，12ram为高度敏感。 1．6．3对幽门螺旋杆菌的抑制作用 幽门螺旋杆菌菌落的洗脱和比浊：用生理盐水将培养皿表面的茵落洗脱下来．同麦 氏标准比浊管进行比浊，确定菌数的浓度，使其浓度控制在105c[u／mL。 吸取幽门螺旋杆菌菌液0．5mL于培养基放置1h，待表面的菌液固定后打孔，孔直径 果、测量抑菌圈直径，三次重复． 第四次全国发酵工程学术讨论会 感；直径，12ram为高度敏感。 2结果与分析 2．1对大肠杆菌的抑制作用 大肠杆菌和乳酸菌菌液混合培养24h后，稀释计数其中的活菌数。结果见表1。 从表1可以看出，供试菌株与大肠杆菌混合培养24h后，大肠杆菌的菌数均有所下 降，下降的程度因菌株不同各异。以YD2410抑制大肠杆菌的对照看来，下降程度最大 YD2511对大肠杆菌的抑制作用与对照菌株相似：菌株YD2532抑菌能力相对较差。 2．2五株乳杆菌对沙门氏菌的抑制作用 袭l不同菌株对大肠杆菌的抑制作用 通过营养琼脂平板扩散法，每株菌株