猪流感病毒的分离鉴定、HA基因的克隆序列分析和血清学研讨.pdfVIP

丫662045 学校名称垡主壅些盔堂 分类号—— 学校代码!Q5Q皇 密级—— 猪流感病毒的分离鉴定、HA基因的克隆序列分析 和血清学研究 InfluenzaVirusIsolationand and Swine theHA and Studies of Serological Analysing gene 研究生： 伍锐 导 师： 金梅林教授 陈焕春院士 指导小组： 金梅林教授 陈焕春院士 郭爱珍教授 何启盖 副教授 吴斌 副教授 方六荣 副教授 专 业： 预防兽医学 研究方向： 病毒性传染病 学位级别： 硕士 中国 武汉 二oO四年五月 摘 要 influenza 猪流感(SI)是由猪流感病毒(Swinevirus，SIV)引起的不同日 龄、性别和品种猪的一种急性、热性和高度接触性的呼吸道传染病。1918年美 毒。迄今为止，SI已遍布美、欧、亚、非等世界各地。猪流感的暴发，对全球 养殖业造成了巨大的经济损失。猪流感除具有兽医学意义外，更为重要的是生态 学和公共卫生意义。目前，猪流感的研究，己成为研究的热点。 2002年，我国一些地方暴发了猪流感。为查明此次流行的病原，本实验室 对收集的病料进行了分离鉴定。利用猪流感标准的诊断试剂，鉴定分离毒株为 H3亚型猪流感病毒。对分离的毒株，我们进行了大量的生物学特性的研究：分 离毒株血凝性广泛，血凝素对热不稳定：分离毒株对酸、热和乙醚等理化因素敏 感；致病性试验结果表明，分离毒株对鸡胚表现为高致病力；在试验条件下，分 离毒株能感染小鼠和实验猪，表现典型的呼吸道症状和肉眼病变。 利用RT-PCR，扩增了HA基因的完整HAl部分。序列分析结果表明，分离 毒株和禽流感H5亚型病毒的序列高度相关。进化分析结果表明，Fujian株猪流 感分离株与禽流感病毒属于同一分支。 初步建立了猪流感间接ELISA，优化了猪流感间接ELISA的工作条件，并 进行了特异性和重复性试验。结果表明，该方法有很好的特异性和重复性，可适 用于猪流感的血清学诊断。 我们用建立的血清学方法，对我国猪群进行了SI血清学调查。结果表明， 猪流感己在我国各个猪群存在和流行，其危害也日益加剧。针对猪呼吸道疾病日 益危害养猪业的情况，我们同时对猪流感及混合感染相关病原进行了血清学调 查。结果表明，混合感染中，SI与APP和PCV感染率高，而SI与PRRS感染 率低。 关键词：猪流感病毒：分离鉴定：生物特性；HA基因；诊断方法 Abstract Swineinfluenzaisa infectious diseasecaussedSwine highly respiratory by InfluenzaVirus s