两种游离DNA检测方法的比较研究.pdfVIP

交通医学 2014年第 28卷第 6期 MedJofCommunications2014．Vo1．28．No．6 · 579· [文章编号]1006—2440{2014)06—0579—03 · 论著与基础研究 · 两种游离DNA检测方法的比较研究 施 维 ，戚 菁，申娴娟 ，吴信华，鞠少卿，刘才旺 (南通大学附属医院外科综合实验室．江苏226001) [摘 要】 目的：对比评价人血清游离DNA的分支 DNA(bDNA)检测和实时荧光定量聚合酶链反应 (RT-qPCR) 检测方法。方法：收集44例人血清标本，分别运用bDNA技术和荧光定量PCR检测其游离DNA浓度 ，对2种方法检 测结果做分析比较。同时采用bDNA技术分别检测其中10例血清和血浆游离DNA含量。结果：bDNA技术的检测结 果和荧光定量PCR具有较高的相关性 (r=0．7077，P0．0001)；血清较血浆具有较高的游离DNA的水平。结论：bDNA 操作简便且结果可信，适用于人群大规模筛查游离DNA水平。 [关键词】游离DNA；分支DNA；实时荧光定量聚合酶链反应；化学发光免疫分析仪 【中图分类号】Q523 [文献标志码]A Comparativestudyoftwomethodsfordetectionofcell-freeDNA SHIWei，QiJing，SHENXianjuan，WUXinhua，JUShaoqin，LIUCaiwang (ComprehensiveSurgicalLaboratory，theAffiliatedHospitalofNantongUniversity，Jiangsu226001) A【bstract] Objective：ComparetwomethodstodetecttheconcentrationsofseFumcell-freeDNAbyusingbranched DNAassay(bDNA)andreal—timefluorescencequantitativereal—timepolymerasechainreaction(RT—qPCR)．Methods：44 samplesofserum cell-freeDNA weremeasuredbybothbDNAbasedonAlusequenceandqPCR．Thecorrelationbetween thetwomethodswasanalyzedbyaSpearmanranktest．Detectionofcell—freeDNA inhumanplasmaandseurm wasana— lyzedbybDNA．Results：ItwasdemonstratedinthepresentstudythatthebDNA methodwashighlycorrelatedwithreal- timePCR (r=0．7077，P0．0001)．Cell—freeDNAconcentrationswerehigherinseurmthaninplasma．Conclusion：bDNA assayhadadvantagesoflowertimeandlaborcomparedtotheqPCRmethodthatisapplicabletoscreeningconsideration． K【eywords】 cell-freeDNA；branchedDNAassay；real—timefluorescencequantitativepolymerasechainreaction 游离DNA又称循环 DNA，是指一种无细胞状 1 材料与方法 态的胞外 DNA，存在于血浆或血清、脑脊液及滑膜 1．1 标本来源 44例血清标本来 自本院检验科，其 液等体液中。目前研究提示游离DNA在肿瘤发生的 中女32例，男 12例，年龄