微工第2章培养基制备与灭菌.ppt

* 第二章 培养基制备与灭菌 * 四、影响培养基灭菌的其他因素 培养基成分、pH值、培养基中的颗粒、泡沫 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 五、分批灭菌与连续灭菌 一）、分批灭菌的操作过程（实罐灭菌） 1）培养基的预热 培养基先加热到80－90℃，然后再导入蒸汽升温到120－180℃。 目的：1）防止直接导入蒸汽时由于培养基与蒸汽的温度过大而产生大量的冷凝水使培养基稀释 2）防止直接导入蒸汽所造成的泡沫急剧上升而引起的物料外溢。 方法：先将排气阀打开 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 2）培养基灭菌 从各路通入蒸汽（进气口、排料口、取样口），温度升到120－130℃，保温30min * 第二章 培养基制备与灭菌 * 2、分批灭菌的注意事项 1）各路蒸汽进口要畅通，防止短路逆流；罐内液体翻动要剧烈，以使罐内物料达到均一的灭菌温度。 2）排气量不宜过大，以节约蒸汽 3）灭菌将要结束时，应立即引入无菌空气以保持罐压，然后开夹套或蛇管冷却，以避免罐压迅速下降产生负压而吸入外界空气，或引起发酵罐破坏。 4）在引入无菌空气前，罐内压力必须低于过滤器压力，否则培养基将倒流入过滤器。 * 第二章 培养基制备与灭菌 * （二）、连续灭菌： 1、连续灭菌优点： 1）可以采用高温短时灭菌（HTST）； 2）发酵罐利用率高； 3）蒸汽负荷均衡； 4）热效率高； 5）可采用自动控制，降低劳动强度； * 第二章 培养基制备与灭菌 * 2、连续灭菌流程 * 第二章 培养基制备与灭菌 * * 第二章 培养基制备与灭菌 * * 第二章 培养基制备与灭菌 * 六、培养基与设备、管道灭菌条件 1、灭菌锅内灭菌 2、种子培养基实罐灭菌 3、发酵培养基实罐灭菌 4、发酵培养基连续灭菌 5、消泡剂灭菌 6、补料实罐灭菌 7、尿素溶液灭菌 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 作业： 1、微生物发酵培养基的碳源、氮源主要包括哪些物质 。 2、简述发酵工业常用的灭菌方法。 3、试画出两种不同的培养基连续灭菌流程图。 4、有一株枯草芽孢杆菌能产生淀粉酶，请设计一种优化培养基的方案，使该培养基适合该菌株能产酶能力（淀粉酶）。 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 四、原料转换及意义 1、节约原料，减低单耗，提高发酵单位和总收率； 2、开拓新的原料资源和微生物资源：野生植物淀粉、植物纤维、木屑水解物、石蜡、醋酸、乙醇 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 第二节 淀粉水解糖的制备 一、淀粉水解糖的制备方法 1、酸解法： 定义：以酸（无机酸或有机酸）为催化剂，在高温高压下将淀粉水解为葡萄糖的方法. 优点：设备要求简单，水解时间短（20min），设备生产能力大 缺点：高温高压下进行，设备要求耐腐蚀、耐高温、耐高压，副反应多，对原料要求严格，淀粉颗粒不宜过大，淀粉乳浓度不能过高。 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 2、酶解法：（双酶水解法） 定义：用淀粉酶将淀粉水解为葡萄糖的过程。一般分为两步：第一步是利用α－淀粉酶将淀粉液化转为糊精及低聚糖，使淀粉的可溶性增加，这个过程称为液化。第二步是利用糖化酶将糊精或低聚糖进一步水解，转变为葡萄糖的过程，称为糖化。也称双酶法 * 第二章 培养基制备与灭菌 * α-淀粉酶（液化） 葡萄糖淀粉酶（糖化） 优点：1、反应条件温和。 2、酶的专一性强，副反应少 3、可在较高的淀粉乳浓度下水解 4、糖液的营养物质丰富 5、糖液色泽浅，无苦味，有利于糖液的精制 缺点：时间长（2～3）天，要求的设备多，糖液过滤困难。 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 3、酸酶结合法 酸酶法 酶酸法 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 二、淀粉酸水解理论基础 淀粉水解成葡萄糖的反应过程中同时发生这：水解反应、复合反应、分解反应；其中水解反应是主要的。 复合反应：葡萄糖分子间经1-6糖苷键结合成龙胆二糖（有苦味）、异麦芽糖和其他低聚糖（合称复合低聚糖）。 分解反应：葡萄糖 羟甲基糠醛 有机酸、色素等 * 第二章 培养基制备与灭菌 * ㈠淀粉的水解反应 1.淀粉水解过程 颜色变化：蓝色 暗紫 紫 红褐 暗红 红 浅红 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 2、淀粉酸水解反应动力学 属于单分子一级反应类型： K：反应速度常数，由反应条件（如温度、酸度等）而定 C：淀粉浓度 * 第二章 培养基制备与灭菌 * 3、影响酸水解的因素 酸的种类 主要因素 浓度（酸的浓度、淀粉的浓度） 水解温度 *