《病毒与人类健康》总复习(2007.5.31).ppt

病毒与人类健康;1、1898 伊万诺夫斯基和贝杰林克通过他们创造性工作发现了烟草花叶病毒，从而开创了病毒学独立发展的历程。 2、狂犬病——最早记载的动物病毒病 3、1884年 法国 巴斯德Pasteur 狂犬病疫苗 4、病毒学发展经历了4个阶段：经验阶段（病毒的发现）、机体水平研究阶段、细胞水平研究阶段、分子水平研究阶段。;二、病毒的分类与命名; ;三、病毒的分类依据; ;核心（core）：由病毒核酸及其结合蛋白组成，并被壳体包围着的病毒体的中心部分。 核衣壳（nucleocapsid）：病毒核心与衣壳的总称。 囊膜（envelope）: 覆盖在病毒核衣壳外的脂蛋白膜。其组成成分主要来自宿主细胞，是病毒的核衣壳在感染细胞内穿越核膜或在感染细胞表面“出芽”时由细胞膜获得。 纤突（spike）或突起(peplomer）:病毒囊膜表面的糖蛋白突起。;病毒的三种壳体结构 1、二十面体对称（icosahedral symmetry） 2、螺旋对称(helical symmetry) 3、复合对称壳体(complex symmetry);六、病毒体的化学组成;（2）病毒蛋白质的功能 构成病毒衣壳和囊膜的重要成分 保护病毒核酸 参与病毒的吸附与侵入过程，决定病毒对宿主和组织的嗜性 构成病毒的表面抗原 构成病毒的血凝素 构成病毒的酶类;七、 理化因子对病毒的作用 ;（1）温度( “喜冷怕热”) 作用机制：使病毒蛋白质，特别是病毒的表面蛋白质变性。 核酸对热的抵抗力较强。 影响因素：蛋白质、钙、镁、蛋白酶、核酸酶 温度的剧烈变化，尤其是反复冻融常可使许多病毒很快灭活。;（2）电离辐射 机制：电离辐射中的X射线和γ射线作用于其它物质后产生次级电子，次级电子再通过直接和间接作用，作用于病毒核酸（DNA或RNA）而使病毒失活。 单链病毒对电离辐射的灭活作用比双链病毒敏感约10倍。;（3）紫外线（主要作用于核酸） 机制： 使嘧啶碱基之间形成二聚体 DNA：TT、CT、CC RNA：UU 核酸链断裂 分子内或分子间交联 核酸和蛋白质之间的交联 核酸不能复制和转录，从而导致病毒的灭活，但病毒蛋白质的免疫原性仍保持。;;2、化学因子;（1）化学灭活剂 酶类 蛋白变性剂 氧化剂 酸、碱 其它化学试剂：福尔马林和亚硝酸等;酶类 核酸酶 破坏核酸 磷脂酶 破坏囊膜磷脂 蛋白酶：胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等 pH 大多数病毒 pH 6-8 稳定 pHpH5.0 or pH9.0 迅速灭活;脂溶剂 乙醚、氯仿、丙酮：灭活有囊膜病毒 氟里昂、正丁烷：抽提脂质和蛋白质，常用于病毒提纯;机制：与腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶或蛋白质的胺基作用。 病毒的核酸和蛋白质都有破坏作用，但首先是作用于病毒的核酸 用于灭活病毒生产疫苗的甲醛浓度：0.05-0.2%;机制：烷化剂上的活性烷基使蛋白质分子上游离的-COOH、-NH2、-SH、-OH和核酸分子中的N发生烷基化作用，使病毒的蛋白质和核酸结构改变，功能丧失，从而被灭活。 种类：环氧乙烷、环氧丙烷、溴化甲烷、β—丙内酯、乙酰乙烯亚胺等 病毒学中的应用：气体消毒剂 灭活病毒，制备疫苗;石炭酸 阳离子去污剂：SDS、去氧胆酸钠 非离子去污剂：吐温-20、吐温-80、NP-40;石炭酸 剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 吐温和去氧胆酸钠 破坏病毒的囊膜，但可保存病毒粒子原来的蛋白结构和抗原性。 SDS 剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 使蛋白质降解为多肽 溶解病毒囊膜 NP-40 裂解病毒蛋白质; 能够减轻病毒保存过程中其他理化学因子对病毒的损伤，从而保持病毒的感染性、抗原性等生物活性的物质。 甘油： 在50%的甘油盐水，病毒可存活达几十天、几个月至几年（牛瘟病毒例外）。 二甲基亚砜DMSO：减少冷冻过程中微小冰晶的形成 ;八、病毒的保存 ;快速低温冻存 于病毒悬液内加入灭活的动物血清或其他蛋白质保护剂，最好再加一些DMSO（5%-10%），并迅速置-70℃或-196℃。 含病毒的组织材料可以直接低温冰冻保存；如先侵入50%甘油生理盐水中，再行低温保存效果更好。 ;九、 病毒的培养和增殖;十、病毒的增殖;干扰素（interferon,IF) 由具有正常生物功能的细胞在适宜诱生剂作用下产生的一组具有多种生物学功能（抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、维持细胞自身稳定）蛋白质。 特点： 干扰素不是细胞持续合成，而是细胞对强烈刺激如病毒感染的应答时一阶段分泌物。 干扰素具有宿主特异性，例如鼠干扰素对人无效，反之亦然。;