基于相对和绝对定量同位素标记技术的脾气虚大鼠回肠蛋白质组学研究.docVIP

基于相对和绝对定量同位素标记技术的脾气虚大鼠回肠蛋白质组学研究 马艺鑫 宋囡 贾连群 王德山 单德红 张哲 杨关林 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室 辽宁省中医转化医学研究中心 辽宁中医药大学基础医学院 辽宁中医药大学附属医院 X 关注成功！ 加关注后您将方便地在 我的关注中得到本文献的被引频次变化的通知！ 新浪微博 腾讯微博 人人网 开心网 豆瓣网 网易微博 摘????要： 目的:应用相对和绝对定量同位素标记 (iTRAQ) 技术研究脾气虚大鼠回肠蛋白质组的表达, 寻找有意义的差异蛋白, 为探索脾气虚证的现代科学本质提供新的实验方法与依据。方法:12只健康雄性SD大鼠随机分为正常组和脾气虚组, 脾气虚组采用饮食不节加力竭游泳方法造模, 15d后分离提取回肠总蛋白, 以iTRAQ试剂标记后进行质谱检测, 并对差异表达的蛋白进行生物学分析。结果:与正常组比较, 脾气虚组回肠271个上调蛋白, 303个下调蛋白;Pathway显著性富集分析确定下调差异蛋白参与的主要生化代谢途径和信号转导途径有细胞外基质受体交互作用、黏着斑等19条, 上调差异蛋白参与包括PPAR信号通路、甾类激素生物合成在内的通路24条。选择细胞外基质受体交互作用为兴趣通路, 发现与小肠屏障功能密切相关的层粘连蛋白、胶原蛋白以及整合蛋白等19个蛋白发生下调。结论:脾气虚证可能与回肠细胞外基质受体交互作用通路改变及回肠黏膜屏障功能受损相关。 关键词： 脾气虚证; 蛋白质组; 相对和绝对定量同位素标记; 细胞外基质受体交互作用; 回肠; 作者简介：杨关林, 辽宁省沈阳市皇姑区崇山东路79号辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室, 邮编:110847电话:024 E-mail:yang_guanlin@163.com 收稿日期：2016年11月28日 基金：国家重点基础研究发展计划 (973计划) 项目 (No.201133CB531702) Proteome research of ileum in spleen qi deficiency rats based on iTRAQ technique MA Yi-xin SONG Nan JIA Lian-qun WANG De-shan SHAN De-hong ZHANG Zhe YANG Guan-lin Key Laboratory of Ministry of Education for TCM Viscera-State Theory and Applications, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine; Fundamental Medical College of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine; Liaoning University Hospital of Traditional Chinese Medicine; Abstract： Objective: To study proteome expression of ileum inspleen qi deficiency rats by iTRAQ and provide a new experimental method and basis for the study of modern scientific essence of spleen qi deficiency syndrome.Methods: Twelve male SD SPF rats were randomly divided into control group and spleen qi deficiency group.Control group rats were feed with ordinary diet, while spleen qi deficiency group rats were modeled by improper diet with exhausted swimming.Ileum total protein were extracted 15 days later, then labeled by iTRAQ and differential expression proteins were detected by mass fingerprinting and analyzed by software.Results: Compared with the normal group, there were 271 prot