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Plant regeneration via somatic embryogenesis and shoot organogenesis fromimmature cotyledons of Camellia nitidissima Chi金花茶未成熟子叶体细胞胚胎发生、芽器官发生及植株再生的研究  Journal of Plant Physiology 170(2013) 1202–1211 报告人： 不同浓度激素对愈伤组织诱导的影响 由第2类型愈伤组织诱导获得的三种再生途径 球形胚性结构的次生分化 不同浓度6-BA和NAA对芽分化的影响 经过九周培养胚性愈伤组织在改良WPM培养基和MS培养基上的分化比较 山茶科组织培养最常用的诱导和增殖培养基是MS培养基，而WPM培养基很少使用（蒙达尔等人,2004;蒙代尔,2011），这项研究中，我们比较了MS和WPM培养基在金花茶胚性愈伤组织的分化中的影响，结果表明WPM培养基效果是显着好于MS培养基的。在培养基中添加6-BA（1-6mg/ L）和IBA（0.01-2.0mg/ L），是非常适合于芽诱导和增殖（蒙达尔等人,2004）。体细胞胚胎发生被认为是山茶科的最有效的再生途径（Jain,1990）。一般情况下，高细胞分裂素结合低生长素或只单独使用细胞分裂素被发现在山茶科中的体细胞胚胎发生的诱导是必要的。在随后的继代培养中，分裂素要减少或不添加（蒙达尔等人,2004）。 我们的研究结果表明，以子叶为外植体，单独使用2,4-D（4.5bM）可诱导小的白色的愈伤组织，它在任何培养基上从未出现分化现象。本研究中，所有的细胞分裂素（TDZ，6-BA，KT，和ZT），单独或与NAA组合使用，均可以诱导胚性愈伤组织。其中，TDZ诱导的酒红色愈伤组织有很强的活性，也可以分化成不定芽或体细胞胚。但是，不能分化为不定芽和体细胞胚的愈伤组，经过11周的培养，会逐渐变成褐色，最终坏死。 细胞分裂素（TDZ，6-BA，KT，和ZT），单独或与NAA组合使用，可以同时诱导芽器官发生，体细胞胚胎发生和球状胚性结构。然而，他们出现的频率一定的差异： 6-BA是最好的不定芽诱导激素，ZT是最适合诱导体细胞胚胎发生的激素，而KT是最好的诱导球状胚性结构形成的激素。 本研究通过金花茶的未成熟子叶诱导愈伤组织并获得再生植株过程进行了研究。通过器官发生和体细胞胚发生，直接或间接地再生，显然可能的（图6）。胚性愈伤组织诱导需要加入强烈活性的细胞分裂素，TDZ或6-BA，单独使用或与弱活性生长素，萘乙酸，IAA或IBA的组合。胚性愈伤组织可以分化成体细胞胚，球状胚性愈伤结构，或不定芽取决于在培养基中添加的植物调节剂。 比较以金花茶子叶为外植体诱导的愈伤组织分化途径，可以观察到：（1）芽器官发生简单，容易除TDZ以外的植物生长调节剂均可诱导发生。 （2）最适芽器官发生的细胞分裂素是6-BA。（3）芽伸长和生根困难，需要很长一段时间（3-4个月），这将不利于快速繁殖。 （4）使用球状胚性结构繁殖给金花茶提供一个再生的循环过程。总之，从金花茶的未成熟合子胚培养的子叶产生的高度再生培养，与所使用的细胞分裂素和基础培养基有关。通过芽器官发生，体细胞胚发生和球状胚性愈伤途径都可以快速繁殖金花茶。 * 摘 要 金花茶（山茶科）是世界著名的经济观赏植物，花为金黄色。在中国它属于稀有和濒危植物。本文的目的是诱导金花茶体细胞胚胎发生，芽器官发生并使植株再生。在改良的WPM培养基上附加不同植物生长调节剂得到三种类型的愈伤组织（白色，红色和黄色）。在这些愈伤组织中，白色愈伤组织，是4.5μm2,4-D诱导的，红色和黄色愈伤组织是由高浓度的细胞分裂素诱导的，TDZ或6-BA单独或结合弱活性的生长素NAA。胚性愈伤组织可以分化成体细胞胚，球状胚性结构或不定芽，这取决于在WPM培养基上用的植物生长调节剂。6-BA是最好的芽诱导激素，ZT是最好的体细胞胚诱导的激素，KT是最好的诱导球状胚性结构形成的激素。三种再生途径往往发生在同一块胚性愈伤组织团上。大多数芽（80%）在WPM添加IBA 24.6μm和NAA 0.3μm根系发达。而47.5%的体细胞胚能直接萌发，在诱导培养基中添加0.9μm6-BA和0.1μmNAA。球状胚性愈伤组织，可在两个分化途径：芽器官发生和体细胞胚胎发生，进行周期性的培养。由芽生根获得的植株和体细胞胚萌发得到的植株均移植到温室土壤中；8周后，从芽培养得到的苗及体细胞胚发育的苗的存活率分别