正常与感染白斑病的凡纳滨对虾几项免疫指标变化的初步研讨.pdfVIP

中国甲壳动物学会编辑 甲壳动物学论文集 第四辑 褂学虫息秘2003年出版 TRANSACTl0NSOF THE SOCIETYNo．4 CHINESECRUSTACEAN PP．335～340 正常与感染白斑病的凡纳滨对虾几项免疫 指标变化的初步研究’ 宋林生 苏建国1 蔡中华 崔朝霞 方 敏 相建海 刘瑞玉 (中国科学院海洋研究所．青岛26607I，E—mail：lshsong@ms．qdio．ac．cn； ‘西北农林科技大学畜牧兽医学院，陕西杨凌712100) 摘要：白斑病是目前对虾养殖中的主要病害之一，本文采用免疫化学的方法对患白斑病凡 纳滨对虾和正常对虾的抗氧比能力以及溶菌酶活性进行测定，从机体的抗氧化能力角度研 究对虾白斑病发病前后的病理变化，结果显示，患白斑病对虾的超氧化物歧化酶(SOD) 和过氯化氢酶(CAT)活性设显著低于正常对照组(P0．叭)；而患病对虾脂肪代谢氧化 产物丙二醛(blDA)的含量汲显著升高(P0．01)；白斑病对虾的溶菌酶活性与对照组没 有显蔷差异(P0．05)。表明对虾在感染病毒以后机体抗氧化能力显著下降，过量强氧化 剂的产生破坏了机体的细胞手Ⅱ组织．造成组织病变或坏死，最后导致对虾死亡。 关键词：凡纳滨对虾 自斑病毒超氧化物歧化酶过氧化氯酶丙二醛 溶菌酶 warlnamei)是世界eI亡良养殖虾种之一，具有生长速度快， 凡纳滨对虾(Litopena叫s 营养需求低，环境适应性好以及抗病力强等特点。20世纪80年代末，我国开始引进和 养殖凡纳滨对虾，随后养殖规模逐渐扩大，目前已经成为我国养殖对虾的另外一个主要 种。但和养殖中国明对虾一样，凡纳滨对虾的养殖目前也同样遭受到白斑病的困扰，整 个养殖产业的健康稳定发展受到严重威胁。 对虾白斑病是目前全球养殖对虾危害最大的病害之一。自1993年以来，这种虾病 在我国大范围内爆发流行，引起养殖对虾大面积死亡，经济损失十分惨重。大量的研究 已经表明对虾白斑病的病原是一种具有包膜但不具包含体的杆状病毒，即对虾自斑病毒 (White virus，wSSV)。该病毒宿主范围广泛、致病性强，主要侵染对虾 spotsyndrome 的皮下组织、造血组织和结缔组织，造成这些组织的病变和坏死。目前，围绕自斑病的 疾病诊断、病原检测、病原传播途径、组织病理学观察等方面已取得了可喜的进展。本 文从免疫化学角度出发，拟通过对白斑病凡纳滨对虾及正常对虾体‘内的溶菌酶 (Lysozyme，LSZ)、超氧化物歧化酶(Superoxide 白斑病毒后体内抗氧化能力以及脂质过氧化反应的产物MDA含量的变化，探讨对虾白 斑病的病理发展过程，为中国对虾白斑病的预防及快速诊断提供理论依据。 ·337· 一、材料和方法 1．材料 凡纳滨对虾(Litopenaeus 品分成2组，第一组取自未发病池无发病症状的个体，称之为对照组；第二组来自发病 池且有典型发病症状的个体，称之为试验组。去掉头胸甲及附肢，切成小块置于50ml 6．4、0．1 离心管中。加入pH mol／L的PBS缓冲液中匀浆(匀浆过程中注意保持温 000 度)，匀浆液4℃20r／rain离心2h，弃沉淀，将上清一806C保存备用。 2．蛋白质含量的测定 BrilliantBlue EL S， 按照考马斯亮兰(Coomassie G．250)法(Harris V，Angal 1990；吴冠芸、潘华珍、吴翠，2000)测定蛋白质含量。以标准牛血清白蛋白的浓度 及际