栀子悬浮细胞的培养和代谢产物的研讨.pdfVIP

·360· 中国园艺学会第九届学术年会论文集 性，山茶则对高温很敏感。在高温下，它们的净光合速率都表现出不同程度的降低，即使增 加C02浓度完全消除气孔限制，也未能阻止P。的降低。所以这种高温下P。的下降主要是 非气孔限制造成的，而气孔限制导致的P。降低仅占30％左右。 非气孔限制又包括RuBP羧化限制和再生限制。根据我们的数据海芋45t时CE比最 适温度时的CE低47％，而RuBP最大再生速率比最适温度时的最大再生速率低73％；与此 相似，山茶45℃时CE和RuBP最大再生速率比最适温度时分别低80％和97％，因此我们 认为在非气孔限制中RuBP最大再生速率的降低可能是主要限制因素。RuBP最大再生速 率反映了光合电子传递活性，所以最大再生速率的降低就反映了光合电子传递活性的下降。 这种下降可能与光系统II对热胁迫敏感所致。与海芋相比，山茶的光系统II可能对热胁迫 更敏感。 高温条件下CE的降低可能也是P。的下降一个重要原因。我们认为CE的降低有两 种可能性，一是RuBP羧化酶话性确实降低；二是高温条件下RuBP羧化酶与C02的亲和力 下降，这样可能导致CE测定值不能准确反映RuBP羧化酶活性。有实验证明RuBP羧化 酶活性在高温下下降；但也有观点认为RuBP羧化酶活性有很高的热稳定性；还有学者认为 不同生态环境中的植物可能使RuBP羧化酶活性的热稳定性不同。我们的数据显示海芋 45℃时CE比最适温度时的CE低47％，而山茶CE低80％。所以，我们认为海芋和山茶 的RuBP羧化酶活性的热稳定性可能不同。 高温下RP先增强然后又降低，所以RP可能不是P。下降一个重要原因。有学者认为 光呼吸可以维持一定程度的细胞间隙CO：浓度，是对气孔限制的一种响应，我们的实验不 支持这种观点，因为高温下细胞间隙C02浓度持续增加，而且气孔限制程度很小。也许光 呼吸在一定温度范围内的增加可能是RuBP加氧酶活性增加的结果；也许光呼吸在一定温 度范围内有利于防止光合电子传递链的过度损伤，是一种保护机制。 根据我们的实验结果，我们认为在夏季应当对山茶实行适当的降温措施以维持其正常 生长；对海芋则不必采取严格的降温措施。 栀子悬浮细胞的培养和代谢产物的研究 石若夫1王关林2方宏筠2 16022大连 (1大连理工大学化工学院1 j辽宁师范大学生命科学学院116029大连) 摘要对栀子悬浮细胞生长研究表明：5，lOd的继代周期可保持细胞良好的生长状态；红色 红由霉诱导物在一定浓度和耀加时闻对细胞生长是敏感构；栀子悬浮细胞对剪切力有救强的适 应性；红、蓝色光是细胞生长中两种重要的单色光。在悬浮培养过程中拴测到了栀子多掊和黄 色素等代谢产精，因此，运用悬浮细胞培养技术生产栀于多糖和黄色素具有现实意义： 关t词栀子悬浮细胞培养多糖黄色素 三、翮赏园艺 36l 栀子是茜草科栀子属植物干燥成熟的果实，具有泻火除烦、清热利湿、凉血散瘀之功效。 现代中医学用它主治热病心烦、目赤、黄疽、吐血、衄血、热毒疮疡等症。李志孝等还发现栀 子多糖具有抗肿瘤作用。此外栀子中含有大量黄色素，已广泛应用于食品加工行业。由于 受植物来源的限制，市场上栀子的价格也在水涨船高，因此运用生物技术手段生产栀子的有 效成分势在必行。目前国内和国外对此研究得还很不够。本文通过栀子悬浮细胞的培养， 从中检测到了栀子多糖和黄色素等有效成分，为进一步应用生物技术手段生产栀子代谢产 物提供了科学依据。 1材料与方法 1．1试材 通过组织培养诱导的愈伤组织建立的栀子悬浮细胞系。 1．2培养条件 预培养的材料以及没做特别说明的实验，其培养条件如下：29悬浮细胞接种到装有 收获悬浮细胞。 2结果和讨论 2．1 悬浮细胞系的建立 挑选颗粒细小、疏松易碎、外观湿润的白色或黄色的愈伤组织．几次筛选后，继代至稳 定，用于诱导悬浮细胞系。使用的培养基为B5，附加2mg／L2，4一D及少量的BA。通过检 测发现栀子多糖在培养的第10d达到最大值，之后其含量逐渐下降，而黄色素则在培养的第 15d才开始产生。 2．2继代周期对悬浮细胞的生长的影响 细胞培养继代周期是维持