基于ram-hplc在线富集技术检测大鼠血浆及尿液中的呋塞在线富集.pdfVIP

J South Med Univ, 2014, 34(10): 1431-1435 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2014.10.07 ·1431 · 基础研究 基于基于RAM-HPLCRAM-HPLC在线富集技术检测大鼠血浆及尿液中的呋塞在线富集技术检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米米 1 1，2 1 1 1 1，2 1 张晓惠 ，王 荣 ，谢 华 ，尹 强 ，李文斌 ，贾正平 ，张娟红 1 2 兰州军区兰州总医院全军高原损伤防治重点实验室，甘肃 兰州 730050；兰州大学药学院，甘肃 兰州 730050 摘要：目的通过柱切换技术建立限进性填料柱-高效液相色谱法，实现在线直接进样并检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米。方法 以自制限进填料柱为预处理柱，Luna C18柱为分析柱，预处理流动相为水-甲醇（95 ∶5 ，V/V），含体积百分数为0.1%的甲酸，流速 为1 ml/min ；分析流动相为血浆：甲醇- 水（65 ∶35 ，V/V），尿液：甲醇-水（55 ∶45 ，V/V），均含体积百分数为0.1%的甲酸，流速均为 1 ml/min ，柱温为25 ℃；检测波长为274 nm。结果 呋塞米血浆样品在进样100 µl 时，富集效果良好，在0.1~3.2 µg/ml 的浓度范 围内具有良好的线性关系（r=0.9995），尿液进样20 µl，呋塞米浓度在0.5~32 µg/ml范围内具有良好的线性关系（r=0.9991），血样 及尿样的三个加标水平下的平均回收率分别为101.82%~113.36% ，98.75%~112.27% ，日内日间精密度均小于5%。结论 药代 动力学参数AUC0→24 为6.265 µg/（ml ·h ），t1/2 为2.447 h ，Cmax 为1.414 µg/ml；24 h 内呋塞米的累积排泄率为32.50%~39.08%。本 方法简单快速，适用于血浆及尿液中呋塞米的直接进样检测。 关键词：限进性填料；高效液相色谱；呋塞米；在线直接进样；血浆；尿液 Detection of plasma and urine furosemide based on online enrichment and restricted- access media coupled with high-performance liquid chromatography 1 1, 2 1 1 1 1, 2 1 ZHANG Xiaohui , WANG Rong , XIE Hua , YIN Qiang , LI Wenbin , JIA Zhengping , ZHANG Juanhong 1School of Pharmacy, Lanzhou University, Lanzhou 730050, China; 2Key Laboratory of Plateau Environmental Damage Control of PLA, Lanzhou General Hospital of Lanzhou Command, Lanzhou 730050, China Abstract: Objective To establish a method based on restricted access media-high performance liquid chromatography for direct online sample injection and detection of plasma and urine furosemide in rats. Methods The column of restricted access media was used as the pre-treatment column and a C18