木糖发酵生产乙醇的研讨.pdfVIP

木糖发酵生产乙醇的研究 刘健1陈洪章李佐虎 (中四科学陇4E-r-冶金研宄所生化工程国豪重点妾验室，北京100080) 抽要 选育出一株优良的未糖发酵茼株树干毕赤酵母茵7l 2d，并利用纯表糖优化了木糖发酵条件． 利用海藻酸蚺固定化树干毕赤酵母菌增殖细胞，不但能较好满足限戴发酵条件．而且能耐较高糖浓度， 使乙醇发酵浓度提高到209／I．利用半纤维素水解液进行了乙醇发酵的初步研究，基本达到了纯木糖发 酵的效果． *t词半纤维毒：禾糖；乙醇：固定化细胞 半纤维素是纤维质原料的重要组分之一。蒸汽爆破技术能经济有效地回收较纯的半纤维素。 如何充分利用好半纤维素是生物量全利用的关键之--[”。国内外现大多用纯木糖发酵生产木糖醇 【2·”，2，3～丁二醇【“，scpl5,6】和乙醇【7l等。目前，半纤维素微生物转化尚存在以下几个问题：(1) 在厌氧条件下，可发酵半纤维素的主要组成糖(木糖)的微生物较少．而在好氧下生长的微生物 也只有一半删。(2)虽然己发现了发酵木糖的微生物pI，但它们耐乙醇浓度较低，副产物较多， 对发酵条件要求苛刻。(3)大多研究仍集中于菌种选育和简单的条件优化，有关研究的深度、广 度不够，缺乏工程技术措旄。为此，本文从生化工程的角度系统探讨半纤维素微生物转化生产乙 醇可行性。 1材料和方法 1．1菌株 1) 丝孢酵母菌(Trichosporonsp85 NRRL 6704) 2460，NRRL 管囊酵母菌(Pachysolentannophilus 树干毕赤酵母菌(Pichiasapf出NRRL7124) I．2乙醇发酵方法 ℃，70 h。 r／min培养24 l_3固定化酵母细胞发酵乙醇 r／min培养24 在麦芽汁培养基中．接种，30C，180 h，之后，取2ml菌液与48ml、3％海藻 h，形成 酸钠溶液混合均匀，在无菌条件下．用移液管加到2％CaCI：溶液中，于4C静置固化10 r／min增殖 的凝胶粒子直径在3mm以下。将制成的凝胶粒子放入纯术糖培养基中，于30C，180 培养72h．中间换液两次。之后，用无菌水清洗三次，浸泡在无菌水中于4C备用。增殖后的凝胶 ml三角瓶中，摇床培养。 ml乙醇发酵培养基的500 粒子加到含有100 I．4乙醇浓度的测定气相色谱法 1．5木糖醇的测定㈣ 取待测样品0．5ml，加入0．5ml高碘酸试剂混匀．静置8min后加0．5ml SnCl2试剂、5ml变 mI于570nm处比色。高碘酸试剂：用O．25mol／L min，冷却，定容到10 H2SO。 色酸试剂，沸水浴30 SnCI HCI配制0．125mol／L 配此0．03molFLKl04：2：用0．3mol／L SnCl2(现配现用)：变色酸试剂： a 作者偷介：刘健【1967．)．女．学士．工程师． 676 2结果与讨论 2．1菌种筛选 将收集到的能利用本糖的酵母菌进行筛选，以纯木糖作碳源．结果见表1·毕氏酵母